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大鼠牙髓干细胞分化成骨样细胞能力研究

吕长胜  翟旭  
【摘要】:目的提取大鼠牙髓干细胞,观察向成骨样细胞分化能力,并通过免疫荧光对其进行表面成骨标志物检测,观察其钙化结节形成能力,探讨其向成骨样细胞分化能力与特点。方法通过酶消化法处理大鼠牙髓组织获得牙髓干细胞,体外培养扩增,通过倒置显微镜观察形态。通过流式细胞仪检测所获得细胞表面CD45,CD90分子表达;通过免疫荧光染色检测细胞表面STRO-1表达;MTT法测得生长曲线;进行矿化诱导培养;进行茜素红染色观察钙结节形成情况。结果通过酶消化法获得的大鼠牙髓干细胞第二天可完全贴壁生长;所获得的细胞经流式细胞仪检测CD45表达阴性,CD90表达阳性,符合间充质干细胞特性;免疫荧光染色STRO-1表达阳性,符合干细胞表达特性;MTT法绘制生长曲线可见第4天左右进入生长对数期;矿化诱导后牙髓细胞表达成骨细胞表面标志物OCN阳性,表达牙本质细胞标志物DSP阳性;茜素红染色证实有矿化结节生成。结论酶消化法获得的大鼠牙髓干细胞表面标志物表达符合间充质干细胞特点,可向成骨样细胞分化,可形成矿化结节,具有较强的增殖能力,并具有成骨样细胞分化能力,可以作为干细胞治疗骨组织缺损修复的理想种子细胞。

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