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扶正化瘀复方有效组分群的配伍筛选和验证

刘崇敏  徐列明  
【摘要】:目的:为提高该药的疗效和减轻副作用,拟筛选出扶正化瘀复方中主要成分的最佳组分配伍,优化组合形成扶正化瘀复方有效组分群。方法:1.筛选:运用DMN诱导大鼠肝纤维化模型,以"扶正化瘀胶囊"中主要成分的六种提取物(虫草粗多糖、虫草脂溶性组分、苦杏仁苷、丹参酚酸、绞股蓝皂苷和绞股蓝多糖)为研究对象,用均匀设计的方法,采用U_(10)(10~6)表设计分组,以大鼠肝脏羟脯氨酸(Hyp)含量为主要筛选指标,用DAS3.0软件NOMEN(Non-Linear Mixed-Effect Modeling)的方法分析获得最佳有效组分配伍和最佳剂量。2.验证:以第一部分结果为基础,用扶正化瘀方浸膏为对照,在最佳组分配伍基础上加减不同组分,分为:A组:扶正化瘀复方浸膏组(14只);B组:虫草粗多糖+虫草脂溶性组分+苦杏仁苷+丹参酚酸+绞股蓝皂苷+绞股蓝多糖组(14只);C组:虫草粗多糖+虫草脂溶性组分+苦杏仁苷+绞股蓝皂苷+绞股蓝多糖组(14只):D组:虫草粗多糖+虫草脂溶性组分+丹参酚酸+绞股蓝皂苷+绞股蓝多糖组(14只);E组:虫草粗多糖+虫草脂溶性组分+绞股蓝皂苷+绞股蓝多糖组(14只);模型组(18只);正常组(10只)。观察大鼠血清肝功能和肝脏羟脯氨酸(Hyp)含量,以及肝组织病理及胶原纤维程度的变化,对所得最佳配伍进行验证,最终确定扶正化瘀复方的有效组分群。结果:1.筛选实验:用NOMEN方法分析肝脏Hyp含量,显示六种组分抗肝纤维化的作用各有不同,虫草组分为主药,丹参酚酸和苦杏仁苷无明显作用。去除丹参酚酸和苦杏仁苷后肝脏Hyp含量减少更明显。最佳组合为:虫草粗多糖240mg/kg+虫草脂溶性组分0.1ml,/kg+绞股蓝多糖7.3 mg/kg+绞股蓝皂苷20 mg/kg组分配伍。2.验证实验:与模型组肝脏Hyp含量相比,A组(195.34μg/g肝湿重)、B组(207.35μg/g肝湿重)、C组(215.72μg/g肝湿重)和E组(205.74μg/g肝湿重)均比模型组(278.64μg/g肝湿重)减少(P0.05)。血清ALT活性检测,仅A组(69.61U/L)、D组(69.39 U/L)和E组(62.56 U/L)均较模型组(85.94 U/L)明显降低(P0.05);而血清AST活性检测,仅E组(58.39 U/L)较模型组明显降低(79.18 U/L)(P0.05):血清Alb含量检测,则以A组(25 g/L)、B组(25.04 g/L)和C组(24.04 g/L)组明显高于模型组(20.77g/L)(P0.05);A、B、C3组的血清TBiL含量(2.1,2.17,3.19μmol/L)均比模型组(7.01μmol/L)显著降低(P0.05)。大鼠肝纤维胶原染色,用Ridit法半定量分析仅C组较模型组显著下降(P0.05),而图像分析则B、C、D、E组的胶原面积均明显低于模型组(P0.05)。结论:1.均匀设计和N0NMEN法筛选出扶正化瘀复方中的主要有效组分群是:虫草粗多糖、虫草脂溶性组分、绞股蓝多糖、绞股蓝皂苷。2.验证实验则显示虫草粗多糖、虫草脂溶性组分、绞股蓝多糖、绞股蓝皂苷、丹参酚酸和苦杏仁苷的配伍能重现扶正化瘀复方效应。

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