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内毒素性脑损伤过程中脑红蛋白的表达及意义

刘超  闵苏  
【摘要】:本课题通过复制内毒素休克大鼠模型和内毒素脑室注射脑损伤大鼠模型探讨内毒素所致脑损伤过程中大鼠脑红蛋白(neuroglobin,Ngb)的表达变化及其意义,以期为内毒素性脑损伤修复机制的研究和临床干预性治疗提供实验依据。实验Ⅰ:脑红蛋白在内毒素休克大鼠模型中的表达变化。选用SD大鼠70只,随机分为7个组(n=10):1个对照组,经尾静脉注入0.5 mL生理盐水;6个内毒素干预组,采用经大鼠尾静脉注射0.5 mL革兰氏阴性菌胞壁脂多糖(0.016 g/kg体质量)。对照组于注射生理盐水后6h、内毒素干预各组依分组分别于注射LPS后各时间段(3 h,6 h,12 h,24 h,48 h,72 h)收集血浆、脑脊液,并处死大鼠留取海马和额叶皮质。应用酶联免疫吸附法、免疫印迹法和免疫组织化学法检测标本中Ngb含量,应用干湿重法检测鼠脑含水量,应用投射电子显微镜检测大鼠额叶皮质和海马组织神经元细胞器的肿胀程度。①酶联免疫吸附法显示,注射内毒素后额叶皮质、海马、脑脊液和血浆中Ngb含量显著高于对照组(P0.01),48 h达峰值。②免疫印迹法显示实验各组均表达相对分子质量约为17 kD的Ngb蛋白.内毒素干预各组Ngb蛋白表达量显著高于对照组,其中以3 h组表达量最低,48 h组和72 h组表达量最高。③Ngb免疫组化反应阳性物质主要位于锥体细胞的细胞质,呈黄褐色。④注射内毒素后,脑组织含水量明显高于对照组(P0.01),48 h含水量达峰值,为0.8313。Ngb表达量的上调与脑损害程度成正相关,且其过度表达是全身性的;Ngb表达量与内毒素处理的时程密切相关,Ngb表达上调可能是在内毒素休克状态下机体内源性神经保护机制之一。实验Ⅱ在内毒素脑损伤大鼠模型中内毒素剂量和作用时间对脑红蛋白表达变化的影响。按随机单位组析因设计2个处理因素:即剂量因子(低剂量0.05 mg/kg

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