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透骨消痛颗粒干预骨性关节炎模型的超微结构观察(摘要)

陈文列  林如辉  刘献祥  黄云梅  郑良朴  吴广文  黄美雅  林久茂  林薇  
【摘要】:目的:骨性关节炎是常见于中老年骨关节退行性疾病,通过透射电镜观察中药复方透骨消痛颗粒干预兔膝骨性关节炎模型的超微结构,探讨透骨消痛颗粒治疗骨性关节炎的作用机理。方法:6月龄新西兰大白兔36只,体重2100±100g,雌雄各半,随机分组实验。①正常对照组:正常饲养,不做任何处理;②关节炎模型组:采用改良Hulth法建立膝关节骨性关节炎模型,1周后开始每天强迫兔活动0.5h,连续15周;③透骨消痛颗粒低、中、高剂量组:造模后大白兔分组,分别用5g、10g、20g透骨消痛颗粒剂灌胃,每天1次;同时设阳性对照药组(造模后大白兔用壮骨关节丸1g/5ml水溶液每日灌胃);各组动物按各时间点,即灌药后每隔3周至第15周,分批进行影像学观察并取材供光镜、电镜观察。透射电镜制样与观察:切取胫骨平台软骨及软骨下骨组织1×1×3mm~3(长轴与软骨面平行),3%戊二醛-1.5%多聚甲醛前固定,5.5%EDTA-1.5%戊二醛脱钙-固定,1%四氧化(?)后固定,环氧树脂包埋;半薄切片美蓝-天青染色,光镜辅助观察细微结构并定位;超薄切片铀-铅染色,日立H-7650型透射电镜观察骨组织相关细胞与基质成分的超微结构变化,SIS公司2K×2K CCD相机拍摄。结果:①正常对照组:软骨细胞呈较大的椭圆形或扇贝形,细胞表面可见较多细而短的突起;细胞核圆形或椭圆形,核内常染色质为主,染色质均匀;胞质内可见粗面内质网、线粒体等,糖原颗粒散在,有的细胞微丝成束;静止期软骨细胞的细胞器较少。软骨组织基质中有丰富纤细的胶原原纤维。软骨与软骨下骨交界处,有低电子密度与高电子密度相邻的骨基质区域,其纤维排列方向不一致。成骨细胞少见。骨细胞呈扁椭圆形,在陷窝内细胞表面突起明显,胞质相对较少,细胞器少见;核内异染色质丰富、散在。骨组织基质中有丰富的横纹明显的胶原原纤维。见哈佛氏管。(图1-4)②关节炎模型组:软骨细胞固缩变性,呈多角形等不规则形,表面突起较少;细胞核变形、固缩,或异染色质边聚,呈凋亡细胞核;胞质基质深染,部分细胞器结构破坏,糖原聚集,可见脂滴。软骨下骨部位,骨小梁粗细不一、可见骨折,腔隙孔洞大小不同。骨细胞大小不一,呈不规则形,突起较少;细胞核不规则形,异染色质边聚,细胞凋亡多见。(图5-8)③透骨消痛颗粒低、中、高剂量组:软骨细胞椭圆或扇贝形,表面突起较多;核椭圆形,核染色质均匀;胞质中粗面内质网较发达,部分池扩张明显,糖原颗粒散在、多见,微丝丰富;软骨细胞群中同源细胞多见,未见明显变性现象,低剂量组有很少数细胞坏死。软骨下骨部位,低剂量组可见凋亡细胞;成骨细胞长椭圆形,突起较少,中、高剂量组中的成骨细胞数量比低剂量组少,而骨细胞呈椭圆形或梭形,多数结构较正常;骨小梁、腔隙孔洞大小比模型组明显改善。(图9-16)。阳性对照药组(壮骨关节丸干预组):细胞状况相似于透骨消痛颗粒组。结论:中药复方透骨消痛颗粒能减少软骨细胞的变性、骨细胞的凋亡,改善骨性关节炎的软骨与软骨下骨的超微结构。

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