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扶正化瘀方对纤维化大鼠血管生成的影响

陈倩  吕靖  王清兰  陈园  彭渊  陶艳艳  刘成海  
【摘要】:目的:观察扶正化瘀方对肝纤维化大鼠肝组织HIF-1α表达及血管生成的影响,初步探讨扶正化瘀方调节肝脏缺氧与微血管生成的抗肝纤维化作用机制。方法:Wistar雄性大鼠37只,体重150±10g,清洁级,随机分为正常对照组(5只),模型组(18只),扶正化瘀方干预组(14只)。大鼠以DMN 10μg/kg大鼠体重剂量腹腔注射,每日1次,每周连续3天,共4周,第1周注射2/3量;正常组注射等量生理盐水。大鼠经4周成模后,扶正化瘀方组以10ml/kg大鼠体重灌胃(剂量相当于60kg成人每kg用量的10倍),正常组及模型组灌以等体积生理盐水,每日1次,共4周。天狼星红染色观察肝组织胶原沉积情况;采用免疫组化结合软件计数的方法检测微血管密度(microvessel density,MVD),Western Blot分析CD31蛋白表达;免疫组化观察HIF-1α的蛋白表达分布;Western Blot检测HIF-1α、VEGF-A及其受体的蛋白表达;荧光原位明胶酶谱法及生化明胶酶谱法分析明胶酶活性。结果:与正常组相比,模型组肝组织胶原增生明显,形成较厚的完全纤维间隔,肝窦和纤维间隔处MVD明显增加,肝组织HIF-1α、VEGF-A及其受体表达显著升高,且细胞核内大量表达HIF-1α,MMP-2/9活性显著升高,肝窦部位及纤维间隔处尤为明显;扶正化瘀方干预后,肝组织胶原沉积明显减少,MVD显著降低,HIF-1α、VEGF-A及其受体表达明显降低,MMP-2/9活性显著抑制。结论:扶正化瘀方抗肝纤维化的作用机制可能与下调肝组织HIF-1α的表达,降低MMP-2/9活性及血管生成因子的表达,从而抑制血管病理生成有关。

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