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旋覆代赭汤对胃窦平滑肌细胞收缩和钙离子浓度的影响

时昭红  石拓  林丽莉  陶春晖  
【摘要】:目的:胃肠动力性疾病的发生由平滑肌收缩的改变密切相关,旋覆代赭汤具有较强的促胃动力作用,但是关于其含药血清对胃平滑肌细胞Ca~(2+)的影响尚未见报道。本实验通过镜下观察不同浓度的含药血清对大鼠胃窦平滑肌细胞(smooth muscle cell,SMC)收缩作用,并应用CPC法检测含药血清对大鼠胃窦SMC收缩后Ca~(2+)总浓度变化,探讨旋覆代赭汤含药血清对大鼠胃窦SMC收缩的作用机制。方法:SD大鼠清洁级雄性大鼠10只,经麻醉,无菌剖腹取胃,剪取胃窦(距幽门约0.5cm),剪碎成1~2mm~2的小肌块,用含0.1%胶原酶和0.01%大豆胰蛋白酶抑制剂的消化液消化两次,制成胃窦平滑肌细胞悬液。台盼蓝检测细胞活性,调整细胞数目为2.5×10~4/ml。加入不同浓度旋覆代赭汤含药血清,用显微测微尺随机测量在视野中细胞长轴变化情况,计算细胞长度和细胞收缩变化百分率,观察含药血清对胃窦SMC收缩作用。用AU2700 OLYMPUS检测仪器镜下CPC法检测钙离子总浓度。结果:本实验通过检测不同浓度旋覆代赭汤含药血清对胃窦平滑肌细胞作用后长度的改变,结果表明旋覆代赭汤对胃窦平滑肌细胞有明显的收缩作用。5%、10%、20%旋覆代赭汤含药血清刺激胃窦SMC,细胞收缩呈药物剂量关系,细胞收缩活动随剂量的增加而增强(P0.05), CPC法检测收缩后细胞Ca~(2+)总浓度结果显示用含钙与无钙的缓冲液悬浮的胃窦平滑肌细胞Ca~(2+)浓度比较无明显差异。各剂量组与无钙缓冲液组的细胞内钙离子总浓度相比较无明显差异。结论:旋覆代赭汤含药血清可使胃窦SMC收缩,其机制可能是通过细胞内质网释放Ca~(2+)使胃窦SMC Ca~(2+)升高。钙离子和钙通道在胃肠平滑肌动作电位产生中居主导地位,平滑肌细胞胞浆游离Ca~(2+)在平滑肌细胞收缩过程中起重要的"第二信使"。本实验采用CPC法检测收缩后细胞Ca~(2+)总浓度,显示用含钙与无钙的缓冲液悬浮的胃窦平滑肌细胞Ca~(2+)浓度比较无明显差异,由此推测引起的胃平滑肌细胞收缩时,Ca~(2+)的升高可能来源于胞内钙库,并且介导这一反应的第二信使是IP_3途径。

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