茵陈蒿汤(YCHD)通过抑制HSCs激活干预大鼠DMN诱导肝纤维化的研究

【摘要】：目的:利用DMN诱导的大鼠肝纤维化模型研究茵陈蒿汤抗肝损伤的分子机制,特别关注抑制HSCs的激活和促进激活的HSCs凋亡。方法:大鼠随机分为对照组(n=10)和DMN组(30),腹腔注射0.5%DMN 2ml·kg-1/次、4w(每周前3日1日1次、共12次)制备肝硬化模型,2w末取3只正常和6只模型大鼠作用药前观察。其余DMN大鼠随机分为DMN-Water组及DMN-YCHD组,DMN-YCHD组大鼠经口灌胃2w,4w末处死全部大鼠,取肝组织观测待测项目。结果:(1)茵陈蒿汤可以显著改善肝组织胶原沉积及降低肝组织Hyp含量。正常大鼠肝组织天狼星红染色主要分布在中央静脉壁和门脉周结缔组织。DMN造模2w可见菲薄的纤维间隔;DMN造模4w形成粗大的纤维间隔,完全形成肝硬化。茵陈蒿汤可以显著改善肝组织病理学肝组织Hyp含量测定结果表明,DMN造模2w,Hyp为正常的161%,造模4w为正常的360%,茵陈蒿汤显著降低Hyp含量,为4w模型大鼠的41%。(2)茵陈蒿汤可以显著降低肝组织α-SMA的mRNA,蛋白含量降低其免疫组化染色强度。(3)茵陈蒿汤可以显著抑制CD68及TNF-α蛋白表达。(4)茵陈蒿汤可以显著减低纤维化相关细胞因子的mRNA及蛋白表达,抑制MMP-2活性。(5)凋亡细胞与HSCs激光共聚焦结果表明:在DMN肝硬化模型发展动态及茵陈蒿汤干预过程均未发现HSCs的凋亡。结论:茵陈蒿汤干预DMN大鼠肝纤维化主要是抑制HSCs的激活而非促进激活HSCs凋亡和抑制KCs的激活实现的。