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正常人外周血单个核细胞对雷公藤内酯醇的耐药特征和机制的研究

涂胜豪  张文娟  胡永红  方赫  
【摘要】:目的探讨正常人外周血单个核细胞(PBMC)对雷公藤内酯醇(triptolide,TP)的耐药特征和机制。方法采用递增雷公藤内酯醇剂量的浓度梯度诱导法使正常人外周血单个核细胞产生耐药。四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定细胞对药物的敏感性及耐药指数(RI),逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法分别检测正常对照组和耐药组PBMC中多药耐药相关基因(multidrug resistance gene,MDR1)、多药耐药相关蛋白(multidrug resistance-associated protein,MRP)和肺耐药蛋白(lung resistance-related protein,LRP)的表达。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清液中IL-1β的含量。结果和正常细胞组相比,耐药组细胞的群体倍增时间延长2.7h,耐药指数是1.99,并且MDR1 mRNA、MRP mRNA、LRP mRNA表达量明显增加(P0.01)。雷公藤内酯醇能显著抑制正常组PBMC分泌IL-1β(P0.05).但对耐药组的抑制作用不明显(P0.05)。结论雷公藤内酯醇体外持续诱导可使正常人外周血单个核细胞产生耐药,其耐药性的产生涉及多个相关基因的表达,这可能是导致类风湿关节炎病人临床服用雷公藤一段时间后产生耐受的原因之一。

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