急性肺损伤中一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、内皮素(ET)和一氧化氮合酶表达的研究

【摘要】：目的:采用内毒素(LPS)诱导的幼鼠急性肺损伤(ALI)模型,动态观察一氧化氮(NO)浓度、一氧化氮合酶(NOS)活性和内皮素(ET)浓度变化以及肺组织NOS基因的表达,以探讨它们在ALI中的发病机制。方法:56只4-5周龄幼鼠随机分为生理盐水对照组NS组和急性肺损伤组ALI组,ALI组采用LPS诱导建立ALI模型,用比色法和放射免疫(RIA)的方法动态监测了LPS注射后1、3、7小时静脉血NO、ET浓度及肺组织NOS活性。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测LPS注射后1、3、7小时肺组织内源型一氧化氮合酶(eNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达情况。此外对肺系数(肺干/湿比重),支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量,动脉血氧分压(PaO2,)及肺组织病理学改变也进行了对比分析。结果:与NS组比较ALI组显示进行性肺部损伤,病理组织学变化有肺间质水肿、出血及炎性细胞浸润;BALF蛋白含量(mg/ml)在1小时0.25±0.03)3小时0.34±0.03,7小时0.40±0.07,显著高于NS组0.20±0.06,P值均0.05);肺系数在1小时0.20±0.09,3小时0.18±0.07,7小时0.17±0.06明显低于NS组,0.22±0.02,P值均0.05)。动脉血PaO2进行性下降,7小时已达7.27±0.42 kPa。NO浓度(μ/ml)在1小时64.46±11.69,3小时101.40±21.32,7小时120.30±16.67均明显高于NS组44.43±6.33,P值均0.05;ET逍度(pg/m1)在1小时517.96±33.21,3小时603.61±54.74,7小时681.21±54.74)均显著高于NS组150.25±17.78,P值均0.05。同时伴随有NOS活性(u/mgpro)在1小时0.30±0.05。3小时0.34±0.03,7小时0.45±0.09明显高于NS组0.24±0.03,P值均0.05。NO和ET均有升高,但早期ET/NO比值增加更加明显。iNOS mRNA表达在1小时0.70±0.20,3小时1.88±0.31,7小时2.64±0.38均显著高于NS组,0,P值均0.05),eNOSmRNA表达未见明显变化(P均.05)。结论:NO和ET参与了ALI的病理生理过程,NO的大量产生与NOS活性增高有关,其主要来源为iNOS基因的表达增强。早期高水平的ET可能为诱导NO大量产生的刺激因素。