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MEF2调节肝星状细胞的活化和生长

毛子旭  
【摘要】:背景:目前对肝纤维化的分子生物学机制知之甚少,外界损伤因素促使肝星状细胞活化,转化成肌成纤维样细胞,表达促进α—平滑肌细胞肌动蛋白(α—SMA)产生大量胶原,导致肝脏纤维化。转录调控在星状细胞的活化过程中起着非常重要的作用。在本文中,我们研究了转录因子MEF2在星状细胞活化中的作用。方法和结果:从大鼠肝脏分离星状细胞并培养在塑料细胞培养皿中,在体外培养过程中星状细胞逐步活化,分别收集新分离的和活化的星状细胞,用RT—PCR方法检测MEF2 mRNA水平,用western blot检测MEF2蛋白水平,发现MEF2A和MEF2D的mRNA和蛋白均随着细胞的逐步活化而逐步升高,用luciferase报告基因方法和EMSA方法测定MEF2的活性,在活化细胞中MEF2的DNA结合功能和转录激活功能均升高,将活化星状细胞株HSC—T6培养在基底膜样基质(Matrigel)中,T6将转变成静止的星状细胞,在T6静止过程中,MEF2的蛋白表达和活性均下降。将表达MEF2的质粒转染到星状细胞中,MEF2可显著促进α—SMA的表达,而如果用MEF2 RNAi(small interference RNA)阻断内源性MEF2的表达,α—SMA的量较之对照显著下降。用表达MEF2的重组腺病毒感染星状细胞,测定细胞增殖和细胞周期的分布,MEF2可促进细胞增殖,促进细胞从G0/G1期进入S或G2/M期。结论:MEF2调节肝星状细胞的活化,促进α—SMA表达,促进细胞生长。

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