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川芎有效成分对猪冠脉平滑肌细胞钙激活钾通道的影响

闫福曼  曾晓荣  杨艳  刘智飞  贺军  周文  李妙龄  裴杰  
【摘要】:目的川芎嗪(Ligustrine,Lig)、川芎素(Sodium Ferulic,SF)是中药川芎的有效成分。器官水平证明二者可降低冠脉阻力,增加冠脉血流,改善心肌血供等。钙激活钾通道(calcium-activated potassium channels,Kca)在冠脉平滑肌上分布广泛,表达密度高,与冠脉的舒缩密切相关。本实验研究川芎嗪、川芎素对Kca影响,旨在从分子水平阐述其扩冠机制。方法采用膜片钳单通道技术观察川芎嗪、川芎素对Kca的影响,同时观察药物作用的可逆性。结果1.川芎嗪对Kca的作用在对称性高钾浴液中,其内钙离子固定浓度为10~(-7) mol/L。细胞贴附式膜片上,0.25,0.30,0.40mg/ml的Lig对Kca具明显激活作用。通道开放概率由0.007±0.007(n=6)分别增至0.062±0.051(n=6,P0.05),0.129±0.073(n=6,P0.01),0.314±0.095(n=6,P0.01)。电流幅值用药前后无明显变化。通道平均开放时间虽有增加但经统计学处理无显著差异。平均关闭时间明显减小,由747.7±.403.9mS,分别减至113.3±70.1mS(n=6,P0.05),29.6±13.5mS,13.2±4.5mS(n=6,P0.01)。因此,川芎嗪增加通道开放概率是通过缩短平均关闭时间实现的。在内面向外式膜片上,0.20,0.30,0.40mmol/L川芎嗪也有明显激活Kca的作用。通道开放概率由0.013±0.008(n=9)分别增至0.061±0.030(n=9,P0.05),0.215±0.063,0.383±0.051(n=9.P0.01)。药物对电流幅值无影响。用药后,通道平均开放时间由2.7±1.5mS(n=9)分别延长到4.9±3.004mS,5.1±2.4mS(n=9,P0.05),7.3±3.6mS(n=9,P0.05),平均关闭时间从1014.9±844.4mS分别减少到102.3±86.7mS(n=9,P0.05),33.2±30.6mS,14.0±12.9mS(n=9,P0.05),故在此模式下,川芎嗪通过延长平均开放时间,缩短平均关闭时间来增加通道开放概率,进而提高通道活性。2.川芎素对Kca的作用在细胞贴附式和内面向外式膜片上,浴液为对称性高钾液,游离钙离子浓度为10~7mol/L时,0.5-5mg/ml的川芎素对Kca通道的开放概率、电流幅值、平均开放时间、平均关闭时间无明显影响。结论在急性酶分离的猪冠脉平滑肌细胞上,川芎嗪可通过两个途径激活Kca,一是直接作用,二是经过胞内一系列过程间接激活,且具一定浓度依赖性和可逆性。川芎素对Kca无明显影响,可能有其他机制参与其扩冠作用。

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