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豚鼠银屑病样动物模型皮损中IL-20的表达水平及反义寡核苷酸基因治疗

樊平申  付萌  廖文俊  刘玉峰  
【摘要】:研究目的:观察IL-20在豚鼠银屑病样动物模型皮损中的作用。40只健康成年豚鼠(体重300-400克,性别不拘),5%心得安乳剂由西京医院药剂科配制。反义寡核苷酸自行设计,同时以互补片段作为对照,进行硫代修饰。IL-20反义:2-21 tggactggc ctcacaacctg,正义:Caggttgtgaggccagtcca。实验动物随机分为两组,实验组20只应用5%心得安乳剂均匀外涂双耳背皮肤,每日3次,连续涂4周。对照组10只用单纯乳剂涂抹。4周后取双耳背部皮肤,一只耳用10%福尔马林固定。HE染色及原位杂交。反义寡核苷酸基因治疗:10只豚鼠按第一部分的方法涂抹5%心得安乳剂诱导银屑病动物模型。将IL-20反义寡核苷酸片段及正义寡核苷酸配制于乳剂基质中。15日后取皮损处组织分别做HE染色、原位杂交。我们的实验结果显示:应用原位杂交及RT-PCR方法检测心得安所致的豚鼠银屑病样皮损中IL-20的表达水平,结果实验组较正常对照组均明显增高(P0.01),得到了与人类银屑病皮损一致的结果,从而在分子水平上进一步证明了心得安外涂所致银屑病样皮损的豚鼠动物模型的可行性。我们的实验还证实IL-20反义寡核苷酸乳剂外涂能够明显抑制豚鼠银屑病样皮损的发展,甚至使其逆转。但关于乳剂的最佳浓度、稳定性及寡核苷酸转移效率等问题尚有待做进一步的深入探讨。

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