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水痘——带状疱疹病毒糖蛋白E真核表达载体的构建与鉴定

李福民  
【摘要】:目的:把水痘——带状疱疹病毒(VZV)糖蛋白E(gE)基因片段定向亚克隆到pcDNA3载体上,构建重组VZVgE真核表达质粒。方法:用PCR方法扩增出VZVgE852bp片段,纯化回收目的片段并与pUC-T载体连接。经过蓝白筛选后,用双酶切得到目的基因片段,定向克隆到pcDNA3载体中。并用PCR、电泳和基因测序方法鉴定。结果:用PCR方法扩增出与预期大小相符的VZVgE基因片段,蓝白筛选得到白色菌落及pUC-VZVgE载体,用PCR、电泳和基因测序方法证实pcDNA3-VZVgE(pcVZV-E)及pUC-VZVgE构建成功。结论:本试验构建的pcVZV-E真核表达质粒,含有真核表达所必需的启动子等元件。目的基因克隆方向正确,读码框与翻译产物和VZVgE相符合,为进一步研制VZV DNA疫苗提供了有利条件。

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