重组蝎毒活性多肽ANEPⅢ对大鼠海马和皮质神经元损伤的保护作用及机制

【摘要】：目的考察重组蝎毒活性多肽ANEPIII对原代培养的大鼠海马和皮质神经元损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法原代培养新生大鼠海马和皮质神经元,建立体外损伤模型,考察ANEPⅢ对神经元损伤的保护作用;应用膜片钳的全细胞记录模式研究ANEPⅢ(3～3000 nmol·L~(-1))对原代培养的大鼠海马和皮质神经元电压门控钙离子通道的影响;应用激光扫描共聚焦显微技术考察ANEPⅢ对大鼠海马和皮质神经元细胞内游离钙离子浓度([Ca~(2+)]_i)的影响。结果 ANEPⅢ可显著提高海马和皮质神经元谷氨酸损伤后细胞存活率;对BayK8644、谷氨酸、NMDA诱导的海马和皮质神经元细胞内游离钙离子浓度([Ca~(2+)]_i)升高具有明显的抑制作用;可剂量依赖地降低大鼠海马和皮质神经元高压激活的电压门控钙离子通道电流幅值。讨论ANEPⅢ对海马和皮质神经元谷氨酸损伤具有保护作用,其机制可能与其能抑制电压门控L-型钙离子通道以及配体门控钙离子通道,拮抗细胞外钙离子内流,从而降低大鼠海马和皮质神经元兴奋性有关,这可能是ANEPⅢ发挥神经保护的作用机制之一。