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何首乌提取物对线粒体损伤致能量代谢障碍细胞及动物模型的药效作用观察

张如意  李林  张丽  叶翠飞  
【摘要】:目的建立线粒体损伤致能量代谢障碍大鼠及细胞模型。观察何首乌提取物(SWa)对其药理作用并初步探讨其可能机理,阐述线粒体损伤在AD发病中的作用;能量代谢障碍与Aβ代谢,tau蛋白过度磷酸化等AD发病中的关键环节之间相关性,从线粒体障碍角度为AD治疗提供新的靶的。方法(1)建立线粒体复合体IV损伤细胞模型,荧光显微镜观察SWa对细胞线粒体膜电位影响,荧光素酶自发光法测定ATP含量,生化法测定细胞caspase-3活性,western法检测凋亡相关蛋白表达情况,流式细胞仪检测细胞凋亡。(2)建立线粒体复合体IV损伤大鼠模型,生化法检测模型大鼠线粒体复合体IV活性改变,生化法检测模型大鼠皮层胆碱能系统损伤情况,western法及免疫组织化学法检测模型大鼠海马处神经营养因子及其受体表达情况,免疫组织化学法检测模型大鼠海马处APP及Aβ表达情况,tau蛋白磷酸化的改变。结果线粒体复合体IV损伤细胞膜电位较对照组明显降低,ATP含量减少,抗凋亡蛋白Bcl-2表达增多,凋亡蛋白Bax表达增加,凋亡明显增多。SWa用药后可明显改善上述情况。线粒体损伤模型大鼠皮层胆碱酯酶活力明显增强,海马处神经营养因子及其受体表达下降,APP及Aβ表达增强,磷酸化tau蛋白增加,SWa用药后可明显改善上述情况。结论SWa对线粒体损伤后细胞及动物模型均具有较强的保护作用,其机制可能为保护线粒体,进而抗细胞凋亡,增强神经营养因子在模型动物脑内的表达,抑制Aβ表达及tau蛋白过度磷酸化。

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