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鱼腥草素与人血清白蛋白的共价结合研究

邓志鹏  钟大放  陈笑艳  
【摘要】:目的:研究鱼腥草素与人血清白蛋白的共价结合。方法:将~(14)C-鱼腥草素与人血清白蛋白的孵化样品经液体闪烁计数器测定放射点数,计算其与蛋白的共价结合量;鱼腥草素修饰人血清白蛋白经链霉蛋白酶水解,采用LC/MS/MS方法鉴定鱼腥草素各修饰的氨基酸片段的结构。结果:~(14)C-鱼腥草素与人血清白蛋白迅速发生共价结合,结合量为18.2 nmol/mgprotein;鱼腥草素修饰的人血清白蛋白的酶解样品中,发现生成4个氨基酸结合物,质核比分别为m/z 327.2,489.1,492.0和336.9。经过多级质谱分析与合成的标准对照品对照,确认为鱼腥草素与人血清白蛋白中的赖氨酸、精氨酸以及氮端甲硫氨酸残基生成的加合物。结论:放射性同位素标记法和LC/MS/MS方法证明了鱼腥草与人血清白蛋白能够发生共价结合,并对结合位点进行了确定。

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