收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

泛素-蛋白酶体系统参与的周期调节在全反式维甲酸(ATRA)诱导的白血病细胞分化过程中的作用研究

方艳芬  林美花  周星露  朱琼文  杨波  何俏军  
【摘要】:目的:二十世纪八十年代,我国科学家率先将全反式维甲酸(All-trans retinoic acid,ATRA)成功应用于急性早幼粒白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)治疗,它能特异性诱导APL细胞分化成熟,具有疗效显著、完全缓解率高、毒副作用小等特点,因此将APL由高度致死性发展为高度可治性疾病。但至今为止,ATRA诱导细胞分化的作用机制并未得到系统阐述。据文献报道,维甲酸诱导细胞分化过程伴随着明显的周期阻滞现象,与细胞分化、周期阻滞密切相关的蛋白均通过泛素-蛋白酶体通路降解。但是,关于泛素-蛋白酶体通路在维甲酸诱导白血病细胞分化中的作用并未见文献报道。本实验主要研究泛素-蛋白酶体通路在全反式维甲酸(ATRA)诱导白血病细胞分化过程中的作用,并初步研究其可能的作用机制。方法:用细胞计数法描绘细胞生长曲线,观察细胞增殖情况;采用流式细胞术检测细胞周期变化及细胞分化表面标记抗原CD11b表达;用荧光底物Suc-LLVY-AMC检测细胞内20S蛋白酶体活性;Real-time PCR检测细胞内泛素mRNA表达水平;Westernblotting法检测泛素化蛋白及周期相关蛋白变化。采用蛋白酶体抑制剂MG132处理细胞观察ATRA诱导的细胞分化作用。结果:ATRA诱导的细胞分化过程中,泛素蛋白酶体通路的活性明显增高,主要表现为:细胞内泛素化蛋白表达水平呈时间依赖性递增趋势,而泛素的mRNA表达水平也随着ATRA作用时间的延长而增加。用特异性荧光底物Suc-LLVY-AMC检测泛素-蛋白酶体通路中负责蛋白水解的20S蛋白酶体的活性,结果显示,ATRA可明显提高HL60、NB4细胞内20S蛋白酶体活性,呈明显的时间依赖关系,并于ATRA作用后72 h达到峰值。Western blot结果显示,两株细胞内G0/G1期相关的周期蛋白Cyclin E、CDK2、CDK4、CDK6、Rb、E2F-1等蛋白均随着ATRA作用而呈时间依赖性递减趋势。应用MG132特异性抑制蛋白酶体活性,从而阻断泛素-蛋白酶体通路,观察ATRA对HL60、NB4的诱导分化作用。结果显示泛素-蛋白酶体通路被抑制后,ATRA诱导的细胞分化作用明显减弱,CD11b表达率较ATRA单用组明显减少,阻滞于G0/G1期的细胞明显少于ATRA单用组,提示泛素-蛋白酶体通路在全反式维甲酸诱导白血病细胞分化过程具有重要作用。Western blotting结果显示,MG132作用后,两株细胞内CDK4、CDK6、Rb、E2F-1较ATRA单用组没有明显变化;HL60细胞内Cyclin E蛋白明显累积,而CDK2蛋白没有明显变化;而NB4细胞内CDK2蛋白较ATRA单用组明显增加,Cyclin E蛋白没有明显变化。提示MG132的作用阻碍了周期蛋白的降解,从而使细胞不能有效阻滞于G0/G1期,进一步影响了细胞由不断增殖向分化状态转变的进程。但是我们发现在两株细胞内起关键作用的蛋白又不尽相同,深入的机制探讨有待进一步研究。结论:全反式维甲酸诱导细胞分化过程,泛素-蛋白酶体通路活性明显增强,该通路可能参与调节ATRA诱导的白血病细胞分化过程,其作用机制可能与泛素-蛋白酶体通路参与降解与细胞分化、周期阻滞相关的蛋白相关。本研究为全反式维甲酸诱导细胞分化的作用机制研究提供了一个全新的视角,有助于进一步深入系统研究维甲酸诱导的细胞分化作用机制。

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 贺孝文;;NOB1基因研究进展[J];中华临床医师杂志(电子版);2011年08期
2 文礼;;夫妻争吵影响细胞分化[J];健康人生;2010年01期
3 刘翠华;黄红娜;王琪;郑焙文;朱宝利;;结核分枝杆菌中的泛素样蛋白-蛋白酶体系统研究进展[J];中国防痨杂志;2011年07期
4 彭安;陈敏珍;申东兰;;康莱特注射液诱导Bel-7402人肝癌细胞分化的研究[J];齐齐哈尔医学院学报;2011年14期
5 谭建军;林荣;侯俊丞;董浦江;;衣霉素对RPMI-8226细胞分化的影响[J];川北医学院学报;2011年04期
6 施荣茂;连小华;;毛囊干细胞巢研究现状[J];局解手术学杂志;2011年04期
7 雷霞;伍津津;;基质胶的生物学活性研究进展[J];口腔医学;2011年06期
8 白英伟;田兴松;;骨髓间充质干细胞向淋巴管内皮细胞的分化潜能[J];中国现代普通外科进展;2011年05期
9 龚慧宾;张全胜;沈中阳;宋红丽;;类肝细胞的研究进展[J];天津医科大学学报;2011年02期
10 胡向阳;马义;;丹参水煎液诱导BMSCs分化为神经元样细胞的最佳剂量研究[J];北方药学;2011年08期
11 陈梅玲;沈岳飞;李清华;刘开祥;曾爱源;林小慧;;不同浓度GDNF诱导神经干细胞向多巴胺能神经元分化研究[J];重庆医学;2011年22期
12 胡海燕;古衍;;维甲酸对宫颈癌耐药细胞株分化及凋亡影响的研究[J];齐齐哈尔医学院学报;2011年12期
13 王莉;杨志云;王宪波;;Hedgehog信号通道与相关干细胞增殖与分化的研究进展[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年27期
14 杨开明;王勇;杜赵康;;胚胎早期心脏发育中Bax、Bcl-2及NF-κB的表达及对心肌细胞分化的调控[J];实用医学杂志;2011年09期
15 芮君;裴海涛;;电针刺激对脑缺血大鼠神经干细胞分化的影响[J];青岛大学医学院学报;2011年04期
16 郑丽娜;张晓刚;杨梁;张辉;王佳南;;仿生电刺激在心肌细胞诱导胚胎干细胞向心肌样细胞分化中的作用[J];解放军医学杂志;2011年08期
17 金勋杰;陆幸妍;许多荣;吴飞虎;陈珺;卢丽;杨国柱;秦中华;曾昭利;李青南;;淫羊藿提取液与雌二醇联合用药对大鼠成骨细胞的作用[J];广东医学;2011年08期
18 尹雅玲;李鹏;魏林郁;白瑞樱;王亚莉;;孕酮和孕酮受体拮抗剂米非司酮对K562白血病细胞系增殖和分化的影响[J];中国病理生理杂志;2011年06期
19 高捷;冯凭;;1,25-二羟基维生素D对人大网膜脂肪细胞分化过程的作用[J];重庆医学;2011年21期
20 张传仓;刘卫鹏;杜江;朱为国;封志纯;;兔骨髓基质细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞的方法[J];中国糖尿病杂志;2007年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 方艳芬;林美花;周星露;朱琼文;杨波;何俏军;;泛素-蛋白酶体系统参与的周期调节在全反式维甲酸(ATRA)诱导的白血病细胞分化过程中的作用研究[A];2009医学前沿论坛暨第十一届全国肿瘤药理与化疗学术会议论文集[C];2009年
2 徐志斌;陈刚;朱长进;;蛋白酶体抑制剂研究进展[A];2008年中国药学会学术年会暨第八届中国药师周论文集[C];2008年
3 马仰丽;侯健;;诱导性聚集小体的形成及蛋白酶体β5亚基和多发性骨髓瘤细胞对硼替佐米耐药的相关性研究[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年
4 郑青春;常君丽;谢敏;陈钦浩;王少辉;廖晓梅;;蛋白酶体活性抑制对微管相关蛋白tau的磷酸化的影响及其机制[A];中国生理学会第23届全国会员代表大会暨生理学学术大会论文摘要文集[C];2010年
5 吴宇杰;金长文;;酿酒酵母26S蛋白酶体调节亚基Rpn9的溶液结构研究[A];第十六届全国波谱学学术会议论文摘要集[C];2010年
6 刘珉宇;李炳生;刘全海;;泛素-蛋白酶体以及蛋白酶体抑制剂[A];中国药学会应用药理专业委员会第三届学术会议、中国药理学会制药工业专业委员会第十三届学术会议暨2008生物医药学术论坛论文汇编[C];2008年
7 邵菁;李秋柏;陈智超;;EGCG对多发性骨髓瘤细胞KM3增殖及蛋白酶体活性的抑制作用[A];第11次中国实验血液学会议论文汇编[C];2007年
8 申传安;柴家科;;泛素-蛋白酶体途径的调节机制研究进展[A];全国烧伤创面处理、感染专题研讨会论文汇编[C];2004年
9 俞赞临;张洁;于嘉屏;;泛素-蛋白酶体途径降解蛋白质的机制及其组成成分[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年
10 徐评议;朱雯;李毅;冯慧宇;刘焯霖;;新型渗透性铁螯合剂阻断乳胞素诱导的泛素-蛋白酶体抑制和黑质纹状体DA神经元损伤研究[A];第十一届全国神经病学学术会议论文汇编[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 杜伯雨;睾丸蛋白酶体的鉴定及其功能研究[D];中国协和医科大学;2008年
2 吴涛;2810430M08Rik基因的组织特异性表达及在T淋巴细胞免疫反应中的作用[D];浙江大学;2007年
3 李越;20S蛋白酶体在人视网膜色素上皮细胞老化中的改变及其在诱导衰老中的作用[D];第四军医大学;2008年
4 易欣;组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA介导ERα降解的机制探讨[D];中国人民解放军军事医学科学院;2007年
5 吴江群;骨髓基质干细胞体内成骨分化研究[D];中国协和医科大学;2008年
6 张霞;希夫碱配合物的合成、表征及抗肿瘤活性研究[D];中国海洋大学;2009年
7 陈国强;20S蛋白酶体快速分离和异质性研究及蛋白质体外甲基化修饰和行为表征[D];中国协和医科大学;2010年
8 王新立;人胰腺癌细胞系20 S蛋白酶体的组成和异质性研究[D];北京协和医学院;2009年
9 晏丽;甲基转移酶抑制剂AdOx对细胞多能性相关基因调控的研究[D];北京协和医学院;2011年
10 王海峰;抑制蛋白酶体功能对脑胶质瘤作用的实验研究[D];吉林大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李艳珍;20S蛋白酶体参与人骨髓间充质干细胞复制性衰老进程[D];山西医科大学;2010年
2 阴津华;小檗碱对人大网膜前脂肪细胞增殖与分化的影响[D];山西医科大学;2005年
3 任于果;大鼠胚脑皮层源性神经干细胞体外培养及增殖分化特点[D];安徽医科大学;2005年
4 汪蕾;“心肌样”环境诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的研究[D];武汉大学;2005年
5 崔盈;神经干细胞移植治疗缺氧缺血性脑病新生鼠的实验研究[D];苏州大学;2010年
6 杨文飞;共培养法诱导骨髓间充质干细胞向毛细胞样细胞分化的实验研究[D];福建医科大学;2011年
7 魏欣;胎儿骨髓间充质干细胞向肝细胞的诱导分化[D];第四军医大学;2005年
8 刘楠;Wnt信号通路状态与白藜芦醇抗髓母细胞瘤细胞作用关系的研究[D];大连医科大学;2007年
9 郝晓娜;复方木鸡冲剂对肿瘤细胞诱导凋亡和分化作用的分析[D];大连医科大学;2007年
10 李玲巧;细胞培养芯片的研制及芯片内骨髓间充质干细胞分化控制的前期研究[D];厦门大学;2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 施嘉奇 通讯员 王姿英;探索中药对干细胞分化的作用[N];文汇报;2009年
2 王姿英;中英合作中药调控干细胞分化研究启动[N];中国医药报;2009年
3 陈超;科学家发现引发细胞分化的分子通道[N];科技日报;2010年
4 记者 毛黎 冯卫东;美开发出使干细胞分化成肌肉的基因开关[N];科技日报;2009年
5 张佳星;分化之路 殊途同归[N];科技日报;2008年
6 张佳星;干细胞分化路径存在差异性[N];中国矿业报;2008年
7 岳阳;我国学者初建HIF-1α介导白血病细胞分化新理论[N];中国医药报;2006年
8 本报记者 刘垠;中国干细胞研究应向大动物实验平台挺进[N];大众科技报;2009年
9 刘霞;诱导多功能干细胞“不忘”原初组织[N];科技日报;2010年
10 钱铮;日本新发现,可能修改传统血细胞分化路径图[N];新华每日电讯;2008年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978