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龙葵碱诱导HepG2细胞凋亡的观察

高世勇  季宇彬  于蕾  汲晨锋  邹翔  
【摘要】:目的观察龙葵碱诱导HepG2细胞凋亡作用。方法采用MTT法观察龙葵碱对三种消化系统肿瘤细胞株的半数抑制浓度(IC_(50));AO/EB双染,激光共聚焦扫描显微术(confocal)双通道(PMT1和PMT2)观察不同浓度龙葵碱对HepG2肿瘤细胞形态的影响;PI单染,流式细胞仪测定不同浓度龙葵碱诱导HepG2细胞凋亡的凋亡率及对细胞周期的影响。结果龙葵碱对HepG2、SGC-7901、LS-174三种肿瘤细胞株的IC_(50)分别为14.47μg/mL、大于50μg/mL、大于50μg/mL;AO/EB双染HepG2细胞,confocal观察形态学表明阴性对照组细胞形态正常,PMT1呈现绿色荧光,而PMT2呈现极其微弱的红色荧光;给药组PMT1和PMT2两个通道都有明亮的荧光,0.0032μg/mL龙葵碱组细胞外周呈现微弱的皱缩状结构。0.016μg/mL龙葵碱组细胞形态呈现固缩状,部分细胞核已经变成碎片。0.08μg/mL、0.4μg/mL、2μg/mL龙葵碱组细胞形态进一步被破坏,出现了大量浓染的碎片(核碎裂)和凋亡小体等典型凋亡特征;PI单染,流式细胞仪观察凋亡率,0.0032μg/mL,0.016μg/mL,0.08μg/mL,0.4μg/mL,2μg/mL龙葵碱诱导的HepG2细胞的凋亡率分别为6.0%,14.4%,17.3%,18.9%,32.2%。阳性药0.08μg/mL喜树碱诱导HepG2细胞的凋亡率为21.9%。细胞周期观察发现龙葵碱各不同剂量组G2/M期均消失,S期明显升高。结论龙葵碱对HepG2人肝癌细胞株比较敏感,能够诱导HepG2细胞凋亡,并将HepG2细胞阻滞在S期,影响肿瘤细胞DNA合成。

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