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tau蛋白的直接细胞毒作用

李琪  梁燕  张晶晶  冯利杰  王海萍  沈玉先  
【摘要】:正tau 蛋白过度磷酸化形成的神经元纤维缠结在 tau 蛋白病中广泛存在。本研究利用基因重组技术,将人的全长 tau 基因插入到 pEGFP-Cl 表达载体中,构建成带有绿色荧光蛋白(GFP) 标签的 tau 融合蛋白真核细胞表达质粒 pEGFP-Cl-tau,并转染无内源性 tau 蛋白表达的293T 细胞,建立了瞬时和稳定表达 tau 蛋白的非神经元细胞系。通过观察荧光蛋白的表达情况及细胞的状态,来动态观察过度表达的 tau 蛋白对细胞生长和分化的影响;同时,在体外表达 tau 融合蛋白 His-tau,并纯化获取足够量的 tau 蛋白,观察重组的人 tau 蛋白对神经来源的细胞株 SH-SY5Y 和原代培养的胎鼠神经细胞的毒性作用。观察外源性 tau 蛋白的过度表达对非神经来源的293T 细胞生长与分化的影响。

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