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谷胱甘肽耗竭在丁烯酸内酯诱导的细胞毒性中的作用

王以美  彭双清  
【摘要】:目的本课题组前期研究显示,镰刀菌毒素丁烯酸内酯(Butenolide,BUT)能够引起 HepG2细胞内谷胱甘肽 (GSH)含量的降低,且该事件介导了 BUT 诱导的细胞毒性。现采用不同的巯基含量调节剂调节细胞内 GSH 水平,进一步阐明 GSH 耗竭在 BUT 诱导的细胞毒性中的作用。方法不同的 GSH 含量调节剂:GSH 耗竭剂马来酸二乙酯(DEM)以及巯基化合物 GSH 和 N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理 HepG2细胞后,染毒 BUT。采用 Beutler 改良法测定细胞内 GSH 的含量,MTT 法测定细胞存活率。结果 1mmol/L DEM 作用细胞30 min 可明显降低细胞内 GSH 的含量,而与50μg/ml BUT 联合作用30 min 可进一步耗竭细胞内的 GSH,使细胞内 GSH 含量分别由二者单独作用时的44%和47%降至22%。1mmol/L DEM 单独作用30 min 无明显的细胞毒性,但其预处理却能增强 BUT 的细胞毒性,使细胞存活率由50μg/ml BUT 单独作用8 h 时的51%降至41%。 1mmol/L GSH 和5 mmol/L NAC 预处理细胞30 min 可明显抑制 BUT 引起的细胞内 GSH 含量的降低,使 GSH 含量由50μg/ml BUT 单独作用30 min 时的33%分别增至82%和91%。与对细胞内 GSH 含量的保护作用相一致,GSH 和 NAC 预处理可完全抑制 BUT 的细胞毒性,使细胞存活率由50μg/ml BUT 单独作用细胞8h 时的47%分别提高至115%和112%。结论采用 GSH 耗竭剂和巯基化合物调节细胞内 GSH 含量可明显影响 BUT 的细胞毒性,这一结果进一步阐明,GSH 的耗竭介导了 BUT 诱导的细胞毒性。

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