血脑屏障上γ-氨基丁酸转运体及其相关基因的分布
【摘要】:正目的:分离纯化不含完整神经细胞的大鼠脑微血管片段,用于检测和克隆血脑屏障上特异表达基因。明确γ-氨基丁酸(GABA)转运体(GAT)家族成员基因在血脑屏障上的分布及寻找相关的新成员。方法:颈动脉在体灌注磁珠标记脑微血管,经机械和酶法解离后,体外磁选获得脑微血管片段,由扫描电镜和RT-PCR鉴定并排除完整神经细胞的附着。设计GAT亚家族成员基因的特异引物和同源引物,以脑微血管tRNA为模板,采用RT-PCR扩增目的片段,琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳分离扩增产物,对特异条带分别克隆、测序。应用
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