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从噬菌体十二肽库中筛选吗啡的抗原模拟表位

颜玲娣  宫泽辉  秦伯益  
【摘要】:正 目的:用两株吗啡单抗筛选噬菌体十二肽库以研究吗啡的抗原模拟表位。方法:分别以两株吗啡单抗为靶点,对噬菌体十二肽库分别进行4轮的亲和筛选,各随机挑选12-15个经ELISA鉴定呈阳性的噬菌体克隆测序,通过同源性分析获得表位,并将该表位与经典的内源性阿片肽进行一级结构比较。结果:用两株吗啡单抗筛到的阳性噬菌体克隆能与吗啡抗体特异结合,并且这种结合能被吗啡、海洛因、埃托啡、羟考酮竞争抑制,抑制作用特点基本一致(ED_(50)值分别为:(2.1—4.0)×10~(-8),(2.4-9.8)×10~(-9)mol/L),但不能被美沙酮、纳络酮抑制(药物浓度为10~(-9)—10~(-5)mol/L时,抑制作用均小于25%)。通过阳性噬菌体克隆的融合肽序列分析,从两株单抗分别获得同源性较高的1组共有序列:HXSL,HRXPXXH。共有序列与经典的内源性阿片肽(脑啡肽、内啡肽、强啡肽、nocistatin、内吗啡肽)的一级结构比较基本无同源性。筛得的2组表位能特异地被海洛因依赖患者吗啡抗体阳性的血清识别。结论:该噬菌体克隆展示肽可能是吗啡的抗原模拟表位,不具有内源性阿片肽样的结构,该表位也可能模拟了吗啡的同系物—海洛因、埃托啡、羟考酮的抗原性,但没有模拟美沙酮、纳络酮的

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