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应用噬菌体展示短肽探索腺病毒表位

路秀英  杨贵贞  
【摘要】:腺病毒感染可以引起广泛的疾病,例如急性咽炎、气管炎、肺炎、结膜炎、角膜炎、及胃肠炎等,在我国引起肺炎的腺病毒绝大多数为3型或7型。对于腺病毒感染至今尚缺乏特异性地预防和治疗手段。本研究目的是为了获得含有中和抗体相关的3型腺病毒模拟表位短肽的噬菌体克隆,为设计新疫苗提供新的思路。从噬菌体肽库中筛选目的短肽是近年来发展起来的一项新技术,噬菌体肽库也称噬菌体表位文库,即以噬菌体衣壳蛋白PⅢ为载体,插入一段编码外源短肽的随机基因片段,从而构成了一个长度固定、序列随机的短肽集合体。本研究用3型腺病毒中和抗体筛选噬菌体随机十五肽库,经三轮筛选后,随机挑取了22个噬菌体克隆,分别加入3型腺病毒感染的Hela细胞,用结晶紫染色法观察Hela细胞的病变程度。并选择一个有明显保护作用的,即病变程度较轻的阳性噬菌体克隆进行测序。结果发现8/22个克隆菌体短肽对3型腺病毒感染Hela细胞具有保护作用。其中一个有明显保护作用的噬菌体短肽的序列为:Leu—Val—Gly—Ile—Trp—His—Arg—Leu—Pro—Gly—Ala—His—Arg—Gly—Ala,即LVGIWHRLPGAHRGA。我们得到的结论是噬菌体短肽可以模拟中和抗体相关的腺病毒表位,保护Hela细胞免受3型腺病毒感染。

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