收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

通过自溶酶相关基因的敲除提高枯草芽胞杆菌产量

王轶  陈振民  晋婷婷  陈向东  
【摘要】:枯草芽胞杆菌广泛用于植物、动物及人类的益生菌、生物防治剂产品及工业酶类的生产、异源蛋白的表达等领域,然而其在培养过程中广泛存在着自溶现象导致其生物量的大幅降低。本研究采用多基因失活方法,期望以此来提高其生物量抑制细胞自溶。我们以枯草芽胞杆菌168菌株为材料,选取了以下几个自溶相关的基因:xpf(原噬菌体PBSX中RNA聚合酶δ类似因子);skfA(原噬菌体prophage 1中芽胞形成杀伤因子);lytC(营养期主要自溶酶);sdpC(芽胞形成延迟蛋白);yqxG-yqxH-CwlA(原噬菌体skin中自溶酶基因片段)。利用载体pNNBl94构建了一系列缺失突变体,考察了它们对生物量的影响。同时通过加入NaN_3测定了突变株的自溶活性。结果表明四重缺失突变体AlytCAsdpCAskfAAsdpC抑制了细胞90%以上的自溶,生物量相对于168提高了2倍以上。我们用此突变株进行了β-半乳糖苷酶的胞内表达,通过酶活测定我们发现其胞内的β-半乳糖苷酶量同样得到了提升。突变株能有效提高生物量抑制细胞自溶提高胞内蛋白产量,在工业生产中有着重要的潜在应用价值。

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 刘芳,梁运祥;绿色荧光蛋白基因对枯草芽胞杆菌的标记[J];湖南农业大学学报(自然科学版);2005年05期
2 王涛,王和;细胞壁缺陷枯草芽胞杆菌DPA合成代谢的研究[J];贵州医药;2005年06期
3 王慕华;孙文敬;赵峰梅;杨庆文;郭金权;杨林娥;;紫外诱变耐糖选育D-核糖高产菌株[J];微生物学杂志;2007年01期
4 王涛;王和;;细胞壁缺陷枯草杆菌酸溶性小分子芽胞蛋白及芽胞形成[J];贵阳医学院学报;2008年02期
5 金志雄;毛达勇;张珍;王金勇;;产α-淀粉酶菌株液体培养条件的探讨[J];环境科学与技术;2006年02期
6 罗进贤;廖武祥;谢朝晖;;枯草芽胞杆菌基因文库的构建[J];中山大学学报论丛;1990年02期
7 徐威,苏昕,李福德;碱性蛋白酶产生菌的筛选及发酵条件考查[J];生物技术;1997年03期
8 丁贤;殷波;刘广锋;周世宁;;细菌群体感应抑制活性微生物Zou 03的筛选与鉴定[J];中国微生态学杂志;2010年11期
9 王建玲;赵丛;杜连祥;;枯草芽胞杆菌突变株ZC-7中性蛋白酶催化区域氨基酸突变导致其活力提高[J];生物技术通讯;2009年04期
10 马宏宇;李菁菁;祁高富;喻子牛;赵秀云;;蛋白酶产生菌的化学诱变及酶学性质[J];华中农业大学学报;2010年06期
11 罗秀针;施碧红;郑虹;吴伟斌;施巧琴;;枯草芽胞杆菌FB123细菌素的理化性质及抑菌谱的研究[J];微生物学杂志;2008年01期
12 匡逢春;郑重谊;谭周进;谢达平;肖冰梅;谢丙炎;;影响枯草芽胞杆菌和荧光假单胞菌原生质体再生的因素[J];生物技术通讯;2008年05期
13 李倩;宁德刚;吴春笃;;以CotX为分子载体在枯草芽胞杆菌芽胞表面展示绿色荧光蛋白[J];生物工程学报;2010年02期
14 陈海龙;潘译孚;唐月薇;林资城;利运章;任美茌;徐金娜;邹泽红;黄薇薇;;提高枯草芽胞杆菌7171—6—1肌苷产率的研究[J];微生物学杂志;1984年03期
15 管斌,谢来苏,丁友芳,隆言泉;枯草芽胞杆菌α-淀粉酶高产菌株的选育[J];浙江大学学报(农业与生命科学版);1997年S1期
16 尹焕才;薛小平;谢玉为;唐蕊华;苏婧;宋凯;;静态强磁场对枯草芽胞杆菌的影响研究[J];现代生物医学进展;2008年03期
17 常景玲;张志宏;刘学良;;D-核糖生产菌的原生质体诱变及其发酵培养[J];生物技术通讯;2006年02期
18 王毅;刘云国;习兴梅;陈芙蓉;;枯草芽胞杆菌降解木质纤维素能力及产酶研究[J];微生物学杂志;2008年04期
19 宋辉;班睿;;ribR基因在产核黄素枯草芽胞杆菌中的组成型表达[J];南开大学学报(自然科学版);2007年06期
20 吴振芳;陈惠;曾民;吴琦;;内切葡聚糖酶基因在毕赤酵母中高效表达研究[J];农业生物技术学报;2009年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 晋婷婷;唐玮;陈向东;;枯草芽胞杆菌BG2036胞外释放DNA现象与其缺陷性原噬菌体PBSX的相关性研究[A];基因开启未来:新时代的遗传学与科技进步——湖北省遗传学会第八次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编[C];2009年
2 晋婷婷;赵明明;王轶;唐玮;陈向东;;枯草芽胞杆菌BG2036胞外释放DNA现象与其缺陷性原噬菌体PBSX的相关性研究[A];2010年第四届全国微生物遗传学学术研讨会论文摘要集[C];2010年
3 曹云鹤;乔家运;;枯草芽孢杆菌MA139β-甘露糖酶基因在毕赤酵母中的表达研究[A];中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十次学术研讨会论文集[C];2008年
4 李航;朱丽;黄鹤;戈梅;陈代杰;;万古霉素卤化酶基因的敲除及其阻断突变株代谢产物的研究[A];2008年中国微生物学会学术年会论文摘要集[C];2008年
5 施定基;冉凌飞;王军成;贾晓会;CJohnson;邓元告;;聚球藻7942生物钟基因KaiA的克隆与敲除载体的构建[A];庆祝中国藻类学会成立30周年暨第十五次学术讨论会摘要集[C];2009年
6 施定基;王军成;冉凌飞;贾晓会;CJohnson;徐仲;;聚球藻7942生物钟基因KaiB的克隆与敲除载体的构建[A];庆祝中国藻类学会成立30周年暨第十五次学术讨论会摘要集[C];2009年
7 陈华新;林瀚智;姜鹏;秦松;;海洋蓝藻Synechococcus CC9311藻红蛋白裂合酶基因mpeV基因的克隆与敲除[A];中国藻类学会第八次会员代表大会暨第十六次学术讨论会论文摘要集[C];2011年
8 钟鑫;田野;谭震;Naz Paolocci;高卫东;;HNO对PLB敲除小鼠心肌兴奋-收缩偶联的作用[A];第七届海峡两岸心血管科学研讨会论文集[C];2009年
9 王景;穆媛媛;黎庶;陈志瑾;熊坤;丛延广;;革兰阴性菌基因敲除载体的构建及其应用[A];重庆微生物学会第九届会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2009年
10 师福山;赵德明;;朊蛋白受体基因敲除的打靶载体构建[A];中国畜牧兽医学会2010年学术年会——第二届中国兽医临床大会论文集(上册)[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 常在;Akt1及其异构体在心脏发育过程中的作用研究[D];南京大学;2011年
2 江昊;聚γ谷氨酸在枯草芽胞杆菌和大肠杆菌中的生物合成[D];华中农业大学;2007年
3 林凌;产纤维素酶菌株的筛选和枯草芽胞杆菌内切葡聚糖酶催化活性的改造[D];华中农业大学;2009年
4 徐元喜;Cytophaga hutchinsonii遗传操作体系的建立及应用[D];山东大学;2012年
5 任红艳;小鼠miR-200家族在体型控制和脂肪形成中的功能研究[D];中国农业科学院;2012年
6 刘超;苏云金芽胞杆菌菌株YBT-1520全基因组序列的初步分析[D];华中农业大学;2007年
7 尹秀山;CKIP-1基因的敲除小鼠模型建立及其在骨骼、免疫系统中的生理功能研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2009年
8 王继红;白色念珠菌基因CaFSP1的功能研究和CaMCI4基因的敲除[D];天津大学;2009年
9 苏维恒;水通道蛋白的结构与功能研究[D];东北师范大学;2011年
10 闫宜青;DNA损伤响应机制和自吞噬调控机制之间的分子联系[D];中国科学技术大学;2013年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 吴莉莉;cry2Ab基因载体的构建及其在枯草芽胞杆菌中的表达[D];福建农林大学;2012年
2 冯宇;蛋白酶A敲除对酿酒酵母糖代谢及抗逆性能的调控作用机制[D];浙江大学;2013年
3 吴振芳;内切葡聚糖酶基因在毕赤酵母中高效表达及其结构域重构研究[D];四川农业大学;2009年
4 杨子燕;Paenibacillus kribbensis A11 ThiG基因的敲除及对其抗菌活性产生的影响[D];西南大学;2011年
5 吴燕;嗜酸性喜温硫杆菌基因无痕敲除方法的建立及soxYZ敲除株的性状分析[D];山东大学;2012年
6 顾育育;l32基因的敲除和过表达菌株的构建及其生长特性研究[D];南京师范大学;2011年
7 王丽萍;以木聚糖酶基因为标记构建枯草芽孢杆菌高效表达系统[D];华中农业大学;2006年
8 韩冬梅;枯草芽胞杆菌BSn5中新型抑菌蛋白APn5的鉴定及性质研究[D];华中农业大学;2008年
9 库玛娜(NDIKUMANA Yvonne);敲除莽草酸转运蛋白编码基因shiA对莽草酸积累影响[D];华东理工大学;2010年
10 崔亚娜;兽疫链球菌透明质酸分解酶基因的敲除[D];河北农业大学;2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 通讯员 万姗姗 记者 王春;我科学家一新发现有望使人忘记痛苦[N];科技日报;2008年
2 本报记者 吴晓鹏实习记者 钟啸;小鼠搭桥[N];21世纪经济报道;2007年
3 白毅;我国学者发现:5—羟色胺是调控恐惧记忆的关键因素[N];中国医药报;2008年
4 饶毅 (美国圣路易斯华盛顿大学);男子汉:基因本质及灭顶之灾[N];南方周末;2004年
5 本报记者 冯颖平 张冬素;器官移植能否“走”得更快些[N];浙江日报;2002年
6 一山;美研制出可逆性基因“开关”[N];中国医药报;2007年
7 健康时报记者 薛京王志胜;诺贝尔奖技术造福中国患者[N];健康时报;2007年
8 大 可;婴儿靠什么感受母爱[N];大众科技报;2004年
9 ;《细胞》发表裴钢院士最新研究成果[N];上海科技报;2009年
10 张天军;自身免疫疾病的发生由基因决定[N];中国医药报;2003年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978