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红麻叶绿体DNA非编码区扩增及PCR-RFLP多态性分析

徐建堂  祁建民  陶爱芬  陈美霞  林培清  方平平  林荔辉  
【摘要】:摘要:为研究红麻叶片叶绿体DNA(cpDNA)的非编码区的序列特征,本研究采用改良CTAB方法提取红麻总DNA,以8份红麻光钝感突变体及其4份近缘种基因组DNA为材料,应用8对植物cpDNA通用引物对红麻叶绿体基因组非编码区DNA序列进行PCR扩增,优化cpDNA非编码序列PCR扩增条件,应用4种限制性内切酶(EcoRⅠ、HindⅢ、TaqⅠ、AulⅠ)酶切扩增片段。结果表明:所筛选通用引物适合于红麻cpDNA非编码序列扩增引物,可在红麻光钝感突变体与正常品种均能扩增出条带,扩增产物经1.5%琼脂糖电泳检测,片段大小在0.4kb-2.0Kb之间,共扩增cpDNA片段大小约13kb。,将PCR扩增产物进行酶切,每个片段均有相同的酶切位点,但在cp4引物的PCR扩增产物用AluⅠ酶切获得多态片段,红麻光钝感突变体及其对照的cpDNA存在部分变异,为进一步探讨红麻光钝感突变体与叶绿体基冈组变异之间的关系研究提供理论依据。

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