收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

黄孢原毛平革菌寡肽转运蛋白基因家族的研究

王中山  向泉桔  王广珺  王海燕  张义正  
【摘要】:黄孢原毛平革菌是一种白腐丝状真菌,它在自然界中能将植物产生的木质素彻底矿化为CO_2和H_2O,其全基因组的测序工作已经完成。寡肽转运蛋白(Oligopeptide transporter,OPT)广泛存在于细菌,真菌,植物和动物中。根据基因组序列预测,黄孢原毛平革菌基因组中有16个同源性较高的OPT基因,命名为PcOPT1-PcOPT16,但是有的预测基因序列不完整。首先根据预测序列设计引物,利用RT-PCR和PCR方法,分别克隆了黄孢原毛平革菌的寡肽转运蛋白cDNA及其基因组;随后又利用RNA-Seq测序技术和从头组装,构建了该菌的转录组序列库,经过序列搜寻,共获得16个PcOPT的编码序列,其序列的完整性远远高于预测序列。根据PcOPT基因序列的生物信息学分析,有9个基因可以归类为2个亚家族,所有的寡肽转运蛋白均有14-16个跨膜区,表明它们都是膜蛋白。对黄孢原毛平革菌寡肽转运蛋白基因在不同培养条件下的表达研究结果显示,PcOPT1,2,5,16是次生代谢特异性表达的,其余的PcOPT基因的表达则没有代谢阶段特异性。使用p426GPD载体和营养缺陷型的酿酒酵母PB1X-9B,以合成的寡肽作为唯一氮源来鉴定PcOPT的功能,已经得到PcOPT-2,-4,-6,-8,-11,-13,-14与表达载体p426GPD的重组子,其寡肽转运功能的鉴定正在进行中。将PcOPT-2,-6,-8 cDNA插入到含GFP基因的酵母表达载体pWaldo-GFPe中,转入到酿酒酵母细胞FGY217中进行表达。PcOPT-2和PcOPT-8已表达出融合蛋白。上述研究结果为深入研究这些OPT基因的功能及其蛋白质的结构奠定了坚实的基础。

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 窦会娟,张红梅,吴坤,胡元森,陈红歌,贾新成;黄孢原毛平革菌的固态培养条件及菌剂干燥保存条件研究[J];郑州轻工业学院学报(自然科学版);2005年01期
2 李越中,高培基,王祖农;黄孢原毛平革菌合成木素过氧化物酶的营养调控[J];微生物学报;1994年01期
3 李维,张义正;黄孢原毛平革菌基因启动子的分离与鉴定[J];生物工程学报;2000年05期
4 李慧蓉,张国荣,刘美娟;黄孢原毛平革菌反应体系中藜芦醇的动态变化[J];中国环境科学;2002年05期
5 张朝晖,夏黎明,林建平,岑沛霖;黄孢原毛平革菌对染料和印染废水的降解[J];应用与环境生物学报;2001年04期
6 张朝晖,夏黎明,林建平,岑沛霖;黄孢原毛平革菌培养合成木素过氧化物酶研究[J];浙江大学学报(工学版);1999年02期
7 田聆,张义正;黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)的抗性转化[J];四川大学学报(自然科学版);2000年S1期
8 吴涓,李清彪;黄孢原毛平革菌吸附铅离子机理的研究[J];环境科学学报;2001年03期
9 江明锋,张义正;培养于天然冷杉木片的黄孢原毛平革菌木质素过氧化物酶基因表达的RT-PCR分析[J];微生物学报;2003年01期
10 孙亚范,王海宽,杜连祥,路福平;黄孢原毛平革菌木质素过氧化物酶基因在甲醇毕赤酵母中的表达[J];工业微生物;2005年01期
11 江明锋,张义正;木质素降解条件下黄孢原毛平革菌lip基因转录调控序列的筛选与鉴定[J];遗传;2005年03期
12 李维,张义正;黄孢原毛平革菌原生质体的制备与再生[J];四川大学学报(自然科学版);2000年S1期
13 张朝晖,邵红,周晓云,岑沛霖;三相鼓泡塔生物反应器培养黄孢原毛平革菌合成木素过氧化物酶系[J];应用与环境生物学报;2003年03期
14 胡霜;曾光明;黄丹莲;冯冲凌;彭丹;;黄孢原毛平革菌与重金属交互作用的研究进展与展望[J];高技术通讯;2008年10期
15 苏瑞;马玉洁;马骏;廖洋;操飞;赵仕林;;培养条件对黄孢原毛平革菌降解稻草的研究[J];西南民族大学学报(自然科学版);2009年02期
16 李慧蓉,罗丽娟,罗光坤;黄孢原毛平革菌对代表性染料的生物降解及降解途径的初探[J];环境化学;2001年04期
17 李慧蓉;菌种品系及VA对黄孢原毛平革菌降解两种染料的影响[J];上海环境科学;2001年04期
18 冯冲凌;曾光明;黄丹莲;胡霜;苏峰峰;赵美花;赖萃;;愈创木酚与复合碳源共降解对黄孢原毛平革菌产酶的影响[J];中南大学学报(自然科学版);2010年04期
19 李慧蓉,尹艳,高云霞;聚乙烯醇包埋固定黄孢原毛平革菌方法的探讨[J];江苏工业学院学报;2003年02期
20 丁佐龙,邢邦启;木素过氧化物酶合成的部分影响因素[J];合肥工业大学学报(自然科学版);1998年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王中山;向泉桔;王广珺;王海燕;张义正;;黄孢原毛平革菌寡肽转运蛋白基因家族的研究[A];中国的遗传学研究——遗传学进步推动中国西部经济与社会发展——2011年中国遗传学会大会论文摘要汇编[C];2011年
2 鲁健章;周彦钢;贾建萍;;反相高效液相色谱法在降血压鱼皮寡肽筛选中的应用[A];全国生物医药色谱学术交流会(2010景德镇)论文集[C];2010年
3 胡开亮;严佳珺;;微量元素对黄孢原毛平革菌降解苯酚的影响[A];二氧化氯研究与应用--2010二氧化氯与水处理技术研讨会论文集[C];2010年
4 江明锋;张义正;;培养于天然冷杉木片的黄孢原毛平革菌木质素过氧化物酶基因表达的RT-PCR分析[A];首届中国青年学者微生物遗传学学术研讨会论文摘要集[C];2002年
5 韩道财;洪鹏志;杨萍;毛敏华;;木瓜蛋白酶水解罗非鱼下脚料制备高F值寡肽工艺的研究[A];“食品加工与安全”学术研讨会暨2010年广东省食品学会年会论文集[C];2010年
6 陈路;张日俊;;生物活性肽(或寡肽)饲料添加剂的研究与应用[A];第四届全国饲料营养学术研讨会论文集[C];2002年
7 王丽娟;马秋刚;计成;;体外消化过程中低分子量寡肽释放量与饲料品质的关系[A];中国畜牧兽医学会动物营养学分会——第九届学术研讨会论文集[C];2004年
8 潘峰;朱慧杰;;改进型气升式反应器中木质素过氧化物酶的合成[A];第七届全国磷化学化工暨第四届海峡化学生物学、生物技术与医药发展讨论会论文集[C];2006年
9 江明锋;李校;颜永红;胡国库;张义正;;利用抑制消减杂交和基因芯片技术研究黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysporium)在次生代谢期的基因表达[A];中国的遗传学研究——中国遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编[C];2003年
10 章燕芳;李华钟;华兆哲;陈坚;;黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)合成锰过氧化物酶(MnP)的工艺研究及在染料脱色中的应用[A];中国生物工程学会第三次全国会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2001年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 冯冲凌;黄孢原毛平革菌及其关键功能酶对木质纤维素降解转化特性的研究[D];湖南大学;2011年
2 吴向华;TIE2配体寡肽的设计、筛选及其在基因治疗中的靶向导入作用[D];复旦大学;2004年
3 王海宽;木质素过氧化物酶和锰过氧化物酶基因的克隆及在甲醇毕赤酵母中的表达[D];天津科技大学;2005年
4 陈宝江;寡肽对肉仔鸡消化生理及蛋白质合成调控的影响[D];中国农业科学院;2005年
5 蒋晓云;几种污染环境下五氯酚的微生物修复研究[D];湖南大学;2009年
6 宁大亮;白腐真菌细胞色素P450转化难降解有机物的功能研究[D];清华大学;2009年
7 于文博;氨基酸和寡肽的结构与性质的理论研究[D];中国科学技术大学;2009年
8 徐敬尧;煤炭生物降解转化新菌种基因工程的构建研究[D];安徽理工大学;2009年
9 江明锋;黄孢原毛平革菌不同代谢阶段差异表达基因研究[D];四川大学;2005年
10 李维;黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)转化系统的建立及木质素酶cDNA的同源表达[D];四川大学;2000年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘金伟;酶法制备玉米高F值寡肽及其抗疲劳活性的研究[D];山东轻工业学院;2012年
2 万菡;蛋清高F值寡肽的制备技术研究[D];武汉工业学院;2011年
3 范佳琦;黄孢原毛平革菌去除水体重金属的应用基础研究[D];湖南大学;2011年
4 华从伶;米糟蛋白的提取及制备高F值寡肽的研究[D];南京财经大学;2011年
5 孙亚范;木质素过氧化物酶基因表达载体的构建及其在甲醇毕赤酵母中的表达[D];天津科技大学;2004年
6 张跃灵;黄孢原毛平革菌及其过氧化物酶对印染废水的脱色研究[D];河南农业大学;2003年
7 卢松;微生物处理玉米秸秆的腐解特征研究[D];西南大学;2010年
8 孔芳;酶法水解牛乳酪蛋白制备高F值寡肽混合物[D];上海海洋大学;2010年
9 徐淑霞;黄孢原毛平革菌对土壤中五氯酚降解的研究[D];河南农业大学;2003年
10 徐凤霞;绵羊瘤胃内寡肽代谢规律的研究[D];山东农业大学;2004年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 黎黎;武汉九生堂寡肽研究取得突破性进展[N];医药经济报;2004年
2 本报记者  贺彩丽;寡肽市场深藏数百亿美元[N];医药经济报;2006年
3 本报记者  徐水元;寡肽突破[N];医药经济报;2006年
4 记者 晓青;日化美容等行业面临技术升级[N];民营经济报;2007年
5 白毅;身居“斗室”心系“创新”[N];中国医药报;2003年
6 黄海所;海水鱼绿色饲料添加剂开发获进展[N];中国渔业报;2007年
7 王恬 许若军;饲料源活性及其营养生物学意义[N];中国畜牧报;2002年
8 肖忠武;多肽的开发与应用[N];健康报;2004年
9 刘云涛;抗耐药菌感染新型抗生素研究获进展[N];中国医药报;2008年
10 山东农业大学动物科技学院 高明航夏海涛 高林 张英学;生物活性肽在畜牧业中的应用[N];中国畜牧兽医报;2008年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978