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P53可以通过激活Bnip3参与调控肺癌细胞的凋亡

金焰  李明  吴杰  吕娜  于旸  白静  陈峰  傅松滨  
【摘要】:目的 :p53基因是重要的抑癌基因之一。它抑制肿瘤细胞增殖、参与细胞凋亡调控,但具体机制尚不十分清楚。本研究采用凋亡相关基因芯片检测p53基因介导肺癌细胞发生凋亡的通路,拟阐明与之相关的调控机制。方法 :采用Superarry公司的凋亡检测芯片分别对转染p53前后的四种肺癌细胞系中凋亡相关基因的表达进行检测。通过体外细胞培养,普通光镜、电子显微镜、流式细胞计数法、MTT比色法,siRNA和western blot等体外实验,分别对芯片中阳性基因功能鉴定分析。结果 :感染Ad-p53后,BNIP3基因在高转移细胞系Anip973和95D中的表达量均显著提高,而在低转移细胞系AGZY83-a和95C中表达改变不明显。分别构建BNIP3基因的真核正义表达载体和siRNA,在高转移细胞系Anip973中对该基因进行反义沉默,在低转移细胞系AGZY83-a中过表达该基因,证实了两种条件下均对细胞形态和生长趋势产生一定的影响。而且,分别对上述两种细胞过表达p53后,发现过表达BNIP3的AGZY83-a细胞的凋亡作用得以增强,而对沉默了BNIP3的Anip973细胞的凋亡作用有所下降。结论 :BNIP3参与了p53介导的肺癌细胞凋亡的过程,这可能也是p53介导高转移肺癌细胞系快速凋亡的机制之一。

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