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K562总RNA负载的树突状细胞疫苗的初步实验研究

高跞  范华骅  陆华中  聂晓絢  龚裕春  高峰  
【摘要】:正目的探讨人的树突状细胞(dendritic cell,DC)体外经K562 细胞株总RNA转染后,能否诱导出p210蛋白表达,为DC疫苗的临床应用提供理论基础。方法自健康人浓缩白细胞制品(俗称自膜)分离有粘附特性的单核细胞,经粒单核系集落刺激因子(GM-CSF)+白介素-4(IL- 4)培养5d后,获得未成熟的DC(imature DC,imDC);取对数生长期的K562细胞抽提总RNA,体外以脂质体DOTAP转染DC或直接电穿孔转染。抽提转染前后以及转染24h后的DC内RNA进行 RT-PCR检测;Western-blot分析DC转染24h后的P210蛋白表达

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