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A preliminary investigation on the role of miR-185 in breast cancer

【摘要】:正MicroRNA are endogenously small non-coding RNAs which regulate gene expression by blocking the translation or decreasing the stability of mRNAs.miR-185 is one of this family members,which can induce cell cycle arrest in human non small cell lung cancer and suppress tumor growth.It's still unclear whether it has the relationship to breast cancer or not.In this study,we found that miR-185 inhibited cellular proliferation and promoted apoptosis in T47D cells,indicating that miR-185 might inhibit the occurrence of breast cancer.To futher explore the possible mechanisms in this process,we analysed its target genes. Targetscan and PicTar algorithms showed that stathmin 1(STMN1) may be one of miR-185 target genes. STMN1 is a microtubule-associated protein involved in the regulation of the microtubule filament system by destabilizing microtubules and takes part in the preventative progression of ER-positive primary in breast cancer.To validate STMN1 as the target of miR-185,we set up a luciferase reporter assay.3'-UTR segment of STMN1 was amplified by PCR from human cDNA and inserted downstream of the termination codon of the luciferase reporter gene in the pGL3 control vector.3'-UTR segment of STMN1,deleting putative miR-185 biding site,was used as a negative control.The sense reporter vector was respectively co-transfected with miR-185 mimics,mimics negative control,miR-185 inhibitors,or inhibitor negative control into T47D cells.The results shows that luciferase activity was not affected neither miR-185 mimics nor miR-185 inhibitors,which indicates that STMN1 may not be the target gene of miR-185.To further identify this results,the sense or control reporter vector was co-transfected with miR-185 mimics.Similarly, the luciferase activity wasn't changed significantly.These results indicate that miR-185 may have no association with STMN1.Thus,our data collectively suggest that miR-185 may be involved in the preventative progression of bresast cancer,not related with STMN1.

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