酿酒酵母中的Trs130参与细胞自噬的研究

【摘要】：细胞自噬是真核生物体中一种具有高度保守性的物质降解途径,其在生物体的生长发育、免疫防御、细胞程序性死亡、肿瘤抑制、预防神经退行性病变等多方面有着非常重要的作用。除了已报道的细胞自噬蛋白参与和调控这一过程以外,有报道认为细胞外吐途径中的一些相关蛋白也参与了细胞自噬过程。Trs130作为酿酒酵母中用于调控小G蛋白Ypt31的上游调控因子,参与细胞内囊泡离开高尔基体的运输。本研究将探讨TRSI30突变是否影响细胞自噬及是否通过Ypt31参与细胞自噬。通过采用一些常规的细胞自噬跟踪方法和手段,我们的结果显示trs130ts突变体在限制性温度条件下细胞自噬情况发生改变,表现为:1)在营养丰富的条件下,Ape1不能被运送到液泡内成熟,表明选择性自噬Cvt途径受到影响;2)在营养缺陷的条件下,标志性细胞自噬蛋白Atg8在细胞内的分布发生改变,大量堆积在细胞质中,不能够正常运输到液泡中降解;3)在营养丰富和营养缺陷的条件下,细胞自噬蛋白Atg9均发生聚集。以上突变表型可通过过量表达Ypt31而不是Ypt1进行恢复。这些结果说明调控囊泡运输的小G蛋白及其上游调控因子可通过小G蛋白影响细胞自噬的过程,这为进一步丰富细胞自噬的内容和生理作用提供了实验依据。我们将进一步就小G蛋白及其上游调控因子对细胞自噬的调控机制开展研究。