酿酒酵母中的小G蛋白Ypt51对细胞自噬的影响

【摘要】：细胞自噬是真核生物中一种高度保守的细胞内降解途径,它通过降解细胞内的非必需蛋白质、细胞器等组分维持细胞的生理平衡从而帮助细胞度过逆境。在酿洒酵母细胞中,除了多种白噬相关的Atg(Autophagy)蛋白参与细胞自噬过程外,还有一些调控分泌途径的小G蛋白也参与细胞自噬过程。然而,对于调控内吞途径的小G蛋白是否参与细胞自噬以及如何调控细胞自噬未见详细报道。本研究旨在揭示内吞途径的关键调控因子Rab5的同源蛋白Ypt51对绌胞自噬的影响情况。我们的研究结果显示YPT51敲除后:在营养丰富的条件下,羧肽酶Ape1的成熟受到了严重影响,Atg8聚集到PAS上的数量下降;在饥饿条件下,GFP-Atg8的降解部分受阻,Atg8所标示的自噬体大量堆积在液泡膜上,并进一步通过电镜进行了验证;对自噬体形成至关重要的跨膜蛋白Atg9向PAS上的运输受到了影响,导致Atg9-GFP在PAS上形成的亮点减弱或消失。以上结果说明Ypt51的存在及其正确定位在自噬体的形成及与液泡融合过程中发挥着非常重要的作用。