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P物质联合表皮干细胞促进糖尿病创面愈合与神经再生

朱飞滨  刘德伍  张红艳  彭燕  钟清玲  李勇铁  
【摘要】:观察P物质联合表皮干细胞对糖尿病大鼠创面与神经再生的修复作用,为其进一步临床应用奠定实验依据和理论基础。方法:取健康SD大鼠皮肤标本,采用胰蛋白酶和乙二胺四乙酸联合消化法分离表皮,Ⅳ型胶原黏附法纯化培养表皮干细胞,K19和β1-integrin免疫细胞化学染色鉴定。采用链脲佐菌素常规制作糖尿病SD大鼠模型,取成功建模的糖尿病大鼠48只,于背部脊柱两侧以特制打孔器致直径1.8cm全层皮肤缺损创面,随机分为四组,A组:表皮干细胞+P物质组;B组:表皮干细胞组;C组:P物质组:D组:单纯羊膜对照组。其中A、B两组分别用羊膜负载的表皮干细胞移植修复;A、C两组分别于创周及创中注射10~(-7)mol/L的P物质250μ1,每日2次,连用4天。动态观察各组创面愈合情况;创面组织HE染色观察组织学变化:免疫组织化学I型胶原、Ⅲ型胶原、PGP9.5和P物质染色观察创面胶原变化与创面神经再生情况。结果:与B、C和D组相比较,A组创面愈合时间明显缩短,皮肤组织中I型、m型胶原含量明显增多。A、C两组创面组织中有大量PGP9.5和P物质阳性表达神经纤维再生,部分神经纤维末梢向表皮延伸接近表皮组织。B、D组仅见创面组织深层有少量PGP9.5和P物质阳性神经纤维组织表达,未见神经纤维末梢向表皮延伸。结论:联合应用P物质和表皮干细胞可有效促进糖尿病创面愈合与神经再生。

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