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细脚拟青霉多糖抑制肿瘤细胞的增殖和诱导外周血单个核细胞细胞因子的表达

左江成  邹立林  金丽琴  吕建新  
【摘要】:目的探讨细脚拟青霉多糖的免疫调节和抗肿瘤活性。方法应用水提、乙醇沉淀和层析技术从细脚拟青霉菌丝体中纯化出细脚拟青霉多糖组分I (Paecilomyces tenuipes polysaccharide I,PTPS-I)。采用CCK-8试剂检测PTPS-I 对人外周血单个核细胞(MNC)增殖活性的影响,以及PTPS-I直接对红白血病细胞K562,喉癌细胞Hep2和肝癌细胞SMMC-7721的细胞毒性作用。收集不同浓度的PTPS-I与MNC共培养48 h后的培养基(PTPS-I-MNC-CM),向培养的 K562细胞,Hep2细胞和SMMC-7721细胞中加入50%(V/V)的PTPS-I-MNC-CM 培养72 h,用CCK-8检测PTPS-I-MNC-CM抑制细胞的增殖作用。以不同浓度的 PTPS-I诱导MNC 6 h后,用Trizol提取总RNA,实时荧光定量PCR检测细胞因子TNF-α和IL-6 mRNA的表达。结果PTPS-I在300mg/L和500mg/L浓度时能显著促进MNC的增殖。但PTPS-I对K562、Hep2和SMMC-7721细胞没有显现直接的细胞毒作用。PTPS-I在300mg/L和500mg/L浓度时的PTPS-I-MNC-CM 能抑制肿瘤细胞Hep2和K562的增殖;在500mg/L浓度时的PTPS-I-MNC-CM能抑制肿瘤细胞SMMC-7721的增殖;PTPS-I在一定浓度范围内能显著增强TNF-α mRNA(100mg/L-500mg/L)和IL-6 mRNA(30mg/L-500mg/L)在MNC中的表达,并显现剂量依赖效应。结论PTPS-I具有免疫调节活性,并通过免疫调节发挥抗肿瘤作用。

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