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siRNA抑制SK-BR-3细胞株Her2/neu的表达及细胞增殖

蒋磊  李继承  倪吴花  吴建波  
【摘要】:正目的研究siR2NA(small interfering RNA)对乳腺癌SK-BR-3细胞株Her2/neu基因表达的抑制作用,并观察其对细胞增殖和凋亡的影响,为RNAi技术在肿瘤生物治疗中的应用提供实验基础。方法设计、体外转录合成两条针对Her2/neu基因的siRNA,转染SK-BR-3细胞株;继续培养48 h后, 分别应用RT-PCR法和流式细胞仪测定Her2/neu基因和蛋白的表达变化,Annexin V试剂盒检测细胞凋亡,并用MTT比色法测定细胞的增殖活性。结果两条siRNA能有效降低乳腺癌SK-BR-3细胞株中Her2/neu的表达,分别使Her2/neu基因表达降低了42.88%、49.27%,相应的蛋白表达降低了 25.03%、56.59%。同时,还观察到转染siRNA后,细胞增殖受到抑制,抑制率分别为21%、29%; 并发生细胞凋亡,凋亡率分别为28.51%、42.81%,表明siRNA对Her2/neu表达的抑制能直接对乳腺癌SK-BR-3细胞的增殖和凋亡产生影响。结论siRNA可以有效抑制SK-BR-3细胞株中Her2/neu 的表达,从而抑制细胞增殖,并导致细胞凋亡。

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