siRNA抑制SK-BR-3细胞株Her2／neu的表达及细胞增殖

【摘要】：正目的研究siR2NA(small interfering RNA)对乳腺癌SK-BR-3细胞株Her2／neu基因表达的抑制作用,并观察其对细胞增殖和凋亡的影响,为RNAi技术在肿瘤生物治疗中的应用提供实验基础。方法设计、体外转录合成两条针对Her2／neu基因的siRNA,转染SK-BR-3细胞株;继续培养48 h后, 分别应用RT-PCR法和流式细胞仪测定Her2／neu基因和蛋白的表达变化,Annexin V试剂盒检测细胞凋亡,并用MTT比色法测定细胞的增殖活性。结果两条siRNA能有效降低乳腺癌SK-BR-3细胞株中Her2／neu的表达,分别使Her2／neu基因表达降低了42．88％、49．27％,相应的蛋白表达降低了 25．03％、56．59％。同时,还观察到转染siRNA后,细胞增殖受到抑制,抑制率分别为21％、29％; 并发生细胞凋亡,凋亡率分别为28．51％、42．81％,表明siRNA对Her2／neu表达的抑制能直接对乳腺癌SK-BR-3细胞的增殖和凋亡产生影响。结论siRNA可以有效抑制SK-BR-3细胞株中Her2／neu 的表达,从而抑制细胞增殖,并导致细胞凋亡。