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染色质改构复合物亚基INI1/hSNF5/BAF47参与集落刺激因子(CSF1)的基因转录调控

潘学芳  宋朝霞  翟雷  李晓云  曾宪录  
【摘要】:正染色质改构复合物hSWI/SNF,以依赖ATP酶水解的方式,通过破坏DNA与组蛋白之间的连接来改变核小体的结构,促进基因的转录激活,因此在真核生物基因转录调控中起到关键的作用。此外,染色质改构复合物hSWI/SNF在细胞增殖、分裂、介导抗病毒活性以及抑制肿瘤形成等方面都具有重要的作用。染色质改构复合物hSWI/SNF。大约由8-15亚基组成,INI1/hSNF5/BAF47是其核心亚基之一。 INI1/hSNF5/BAF47是酵母Snf5蛋白的同源物。结构功能分析发现:INI1/hSNF5/BAF47是具有 385个氨基酸的蛋白质,其结构包含有三个高度保守的区域,其中包括两个不完全相同的重复序列 Rpt1和Rpt2,以及C末端一个螺旋环螺旋结构域,即同源区域3(HR3)。目前的研究结果表明, INI1/hSNF5/BAF47能够跟许多病毒以及细胞内的蛋白相互作用,这些相互作用大多都涉及到 INI1/hSNF5/BAF47的Rpt区域,说明Rpt包含与蛋白质相互作用的重要结构域。越来越多的研究结果证实,INI1/hSNF5/BAF47在基因转录调控、细胞周期调控和肿瘤抑制等方面都具有重要作用。在我们的研究中,为了探讨INI1/hSNF5/BAF47是否参与了集落刺激因子(CSF1)的基因转录调控,我们共转染INI1/hSNF5/BAF47的表达质粒及CSF-1启动子的报告基因载体,荧光素酶双报告检测结果表明,INI1/hSNF5/BAF47能够激活集落刺激因子(CSF1)的启动子,即能促进外源CSF-1 的基因转录。RT-PCR结果进一步证明,TNI1/hSNF5/BAF47也能促进内源CSF-1的基因转录。并且, INI1/hSNF5/BAF47结构的完整性对于CSF1的基因转录调控是必需的。研究还发现,RNA干涉质粒 siINl1的转染, 能够抑制INI1/hSNF5/BAF47在细胞中的蛋白表达,因此既能抑制外源CSF-1启动子的激活,也能在mRNA水平上抑制CSF-1的基因转录。以上几个方面的结果都说明, INI1/hSNF5/BAF47参与了集落刺激因子(CSF1)的基因转录调控。为了研究INI1/hSNF5/BAF47参与CSF1基因转录调控的机制,我们进行了染色质免疫共沉淀实验,结果表明,INI1/hSNF5/BAF47 能够被募集到CSF1的启动子上。我们推测,INI1/hSNF5/BAF47可能作为共调节因子,首先需要被募集到CSF1的启动子上,与染色质改购复合物hSWI/SNF共同参与CSF1基因的转录调控。

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