收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

利用生物反应器体系进行梭梭规模化细胞培养的研究

王建华  韩素英  卢琦  丛威  齐力旺  
【摘要】:正梭梭具有冬眠与夏眠特性,抗旱力、喜光性很强,不耐蔽荫,根系发达,在气温43℃、地表温度60-70℃甚至80℃的情况下,仍能正常生长,抗盐性很强,幼树在固定半固定、土壤含盐量0.2-0.3%的沙丘上生长良好,是干旱荒漠区的优良固沙植物,为濒危类三级国家保护植物。由于梭梭自然繁殖困难,我们利用生物反应器建立梭梭细胞培养体系,可达到规模化繁殖的目的;为沙生植物细胞工程的发展开辟一条新途径;采用细胞培养技术,利用合适的生物反应器将组织、细胞定向放大、繁殖梭梭苗木,从而在细胞水平上达到规模化繁殖、再生和规模化生产的目的。本文利用梭梭种子萌发6-10个小时后,选用其下胚轴与子叶为外植体,在附加2,4-D、BA、KT的MS固体培养基上, 诱导产生浅黄色与浅褐色类型的颗粒状愈伤组织,游离并建立梭梭细胞培养系统,转入2.5L生物反应器进行规模化繁殖。结果表明,两种外植体中,下胚轴容易诱导发生浅黄色颗粒状愈伤组织,诱导频率40-60%,子叶诱导频率较低,且以浅褐色颗粒状的愈伤组织为多。实验发现,浅黄色愈伤组织能够正常继代、增殖,不断扩大;浅褐色愈伤组织易分泌其他成分,所有培养中易发生褐变, 不能正常生长从而在继代两次后会导致死亡;在固体培养基上,浅黄色愈伤组织增殖较快,颜色正常;浅褐色愈伤组织短期内颜色会变深、老化死亡。在液体条件尤其是生物反应器中,浅黄色愈伤组织增殖较快,多以几个或十几个细胞团为主,约28天可增殖20倍以上;浅褐色愈伤组织在液体培养过程中分泌的褐色物质,很快使整个培养基和材料褐化,导致细胞增殖很慢或停止,随培养时间的延长,其组织细胞逐渐死亡。可能是由于多糖物质及蛋白质的分泌,细胞容易相互粘附的结果。在培养时,尽管搅拌程度和营养物浓度足够高,但氧及营养成分却因外围细胞及多糖、蛋白质物质的阻碍而影响物质扩散不能到达内部细胞。增强反应器的混合性能,促进物质在反应器内传输, 同时又不至于由于较强的剪切力对植物细胞或幼小器官产生伤害,本研究为梭梭的进一步高技术繁殖与育种提供了科学依据。

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 左萱,王冬梅,周鹏;泛素与融合表达[J];热带农业科学;2005年04期
2 吕晓辉;臧新;杨冬之;;红豆杉细胞的工业化培养[J];时珍国医国药;2006年05期
3 陈岺曦;王伯初;;生物反应器与药用植物毛状根的大规模培养[J];生物技术通报;2007年04期
4 肖浩;;反刍动物转基因研究进展[J];草业与畜牧;2008年09期
5 程钰;孟强;董丽芬;贾彩霞;范成民;王丽萍;;长俊木瓜体细胞胚胎诱导的初步研究[J];西北林学院学报;2008年06期
6 丁海麦;李彩艳;魏春华;;植物生物反应器的研究进展[J];农技服务;2009年09期
7 朱军;李晓瑾;凯撒·苏来曼;贾晓光;;新疆阿魏愈伤组织诱导研究[J];中药材;2009年11期
8 陈瑞栋;;植物生物反应器研究现状和展望[J];江苏农业科学;2009年06期
9 曾作财;张晓东;王金洛;杨兵;李国平;;转基因植物作为生物反应器在畜禽疫苗生产中的应用[J];生物技术通报;2010年05期
10 居超明;毕光杨;;复合添加物在芦笋体外培养中的应用研究[J];适用技术市场;2000年07期
11 张春宝;王凤义;;马铃薯作为生物反应器的研究进展[J];中国马铃薯;2007年03期
12 林小桦;贺红;吴立蓉;张燕玲;刘星;;广藿香愈伤组织诱导和分化再生植株的研究[J];广州中医药大学学报;2009年02期
13 刘建艳;;中空纤维膜生物反应器应用于城市住宅小区生活污水资源化处理的研究[J];绿色科技;2011年06期
14 张华;;废水厌氧处理系统[J];生物技术通报;1985年10期
15 朱明军,韩日畴,吴振强,梁世中,李秋剑,谭字榴,李丽英,赵汝鹏,曹莉,刘秀玲,刘南欣;斯氏线虫生物反应器液体培养的初步研究[J];华南理工大学学报(自然科学版);1999年03期
16 田允波,唐冬生;动物乳腺生物反应器研究及产业化[J];广东畜牧兽医科技;2002年04期
17 柴晓杰;吕品;张宇;;植物基因工程疫苗在畜牧生产上的应用[J];中国饲料;2006年15期
18 陈玉辉;赵凌侠;崔丽洁;唐克轩;;转基因植物生产药用蛋白研究进展[J];中国农业科技导报;2007年05期
19 魏进莉;许浩;蔡进军;李振永;张源润;;两种大花萱草组织培养繁殖的研究初探[J];农村经济与科技;2010年05期
20 王宝珍;;日本当代生物技术的研究[J];生物技术通报;1986年10期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王建华;韩素英;卢琦;丛威;齐力旺;;利用生物反应器体系进行梭梭规模化细胞培养的研究[A];中国细胞生物学学会2005年学术大会、青年学术研讨会论文摘要集[C];2005年
2 王建华;韩素英;卢琦;丛威;齐力旺;;利用生物反应器体系进行梭梭规模化细胞培养的研究[A];中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2005年
3 宋克东;刘天庆;李香琴;葛丹;孙相玉;马学虎;崔占峰;;新型旋转壁式生物反应器内三维组织工程骨的构建[A];第一届全国化学工程与生物化工年会论文摘要集(下)[C];2004年
4 范秀波;刘天庆;刘洋;葛丹;马学虎;;旋转壁生物反应器内无血清扩增脐带血造血干/祖细胞[A];第一届全国化学工程与生物化工年会论文摘要集(下)[C];2004年
5 鞠智好;刘天庆;崔占峰;马学虎;;微载体颗粒在旋转壁式生物反应器内的运动与受力分析[A];第七届全国生物力学学术会议论文集[C];2003年
6 王胜强;黄国强;孙津生;;超重力技术在内循环生物反应器中的应用[A];第二届全国传递过程学术研讨会论文集[C];2003年
7 李校堃;;利用原核生物反应器表达不同蛋白的工程化研究[A];中国生物工程学会2006年学术年会暨全国生物反应器学术研讨会论文摘要集[C];2006年
8 施定基;;研究蓝细菌(蓝藻)生物反应器的回顾[A];中国生物工程学会2006年学术年会暨全国生物反应器学术研讨会论文摘要集[C];2006年
9 时连根;徐俊良;;家蚕作为生物反应器的新用途开发研究(摘要)[A];中国蚕学会养蚕与蚕生理病理学术讨论会论文汇编[C];2000年
10 屈云慧;陈卫民;张婷;;应用生物反应器技术快繁球根花卉的研究进展[A];全国“植物生物技术及其产业化”研讨会论文摘要集[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 周焕城;新型双向旋转灌注重力生物反应器的研制与应用[D];南方医科大学;2011年
2 吴松维;填埋垃圾生物反应器反硝化性能及反硝化微生物研究[D];浙江大学;2010年
3 熊猛;采用生物反应器体外构筑组织工程血管模型的实验研究[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
4 王雪;气升式三相环流生物反应器脱臭性能和优化模拟[D];天津大学;2010年
5 贾晓强;气液固三相生物反应器流动与降酚特性动态行为研究[D];天津大学;2009年
6 赵月龙;四段式生物反应器复合工艺深度处理焦化废水研究[D];哈尔滨工业大学;2010年
7 欧阳峰;生物反应器填埋场渗滤液控制技术研究[D];西南交通大学;2002年
8 周晓东;胎盘基质干细胞骨向分化及生物反应器构建骨组织的修复效果[D];第四军医大学;2005年
9 周文林;家蚕丝腺生物反应器表达hGM-CSF转基因载体的构建及应用研究[D];苏州大学;2007年
10 刘宏远;生物反应器填埋场系统的仿真研究[D];浙江大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 杨忠平;固定化微生物处理废水的实验研究与探讨[D];吉林大学;2006年
2 谢琼虹;血管内皮细胞生物反应器构建的初步研究[D];复旦大学;2008年
3 陈明东;基于虚拟仪器技术的血管组织工程生物反应器的研究[D];南方医科大学;2009年
4 苏冬梅;人血小板生成素重组细胞的培养工艺研究[D];沈阳药科大学;2001年
5 杨巧艳;生物反应器填埋场产甲烷特性研究[D];西南交通大学;2003年
6 陈英文;仿生膜生物反应器在废水处理中的应用研究[D];南京工业大学;2003年
7 王君琴;生物反应器填埋场系统特征研究[D];浙江大学;2004年
8 刘海春;生物反应器填埋场的脱氮功能及其微生物学机理初探[D];浙江大学;2005年
9 赵虎;成骨细胞在新型生物反应器内的大规模扩增[D];大连理工大学;2006年
10 赵鹏;微生物法处理有害废气的实验研究[D];北京化工大学;2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 学生记者 潘正道 成书冉 胡雨寒;降低膜能耗 污水化资源[N];新清华;2010年
2 记者 丁宁 实习生 尹健;用植物表达药物 建安全活体药厂[N];长春日报;2006年
3 胡波;美ELAD细胞生物反应器将在我国用于研究[N];中国医药报;2006年
4 记者 王晖;我省生物反应器获美国专利[N];河南日报;2006年
5 实习生 李函擎 记者 李林岩;坚持自主创新 发展生物产业[N];吉林日报;2006年
6 本报驻加拿大记者 杜华斌;二氧化碳,我爱吃[N];科技日报;2007年
7 奇云;“生物反应器”直击动物制药厂[N];大众科技报;2002年
8 严文虎;藻类生物反应器研究尚需突破[N];中国渔业报;2006年
9 国家生化工程技术研究中心(上海) 张嗣良;我国生物反应器制造水平亟待提高[N];中国医药报;2006年
10 石松;海绵细胞团生物反应器生产老年痴呆和骨关节炎药物[N];科技日报;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978