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甘蓝型油菜小孢子培养

王轶  高辉  王健美  吴俊  李旭锋  
【摘要】:本文对甘蓝型油菜(Brassica napus L.)品种“蜀杂9号”进行了小孢子培养,用“蜀杂9号”油菜主花序的长4±0.5mm的花蕾分离出的游离小孢子,使用NLN、MS、B5培养基(蔗糖浓度使用130g/L),将小孢子的密度调节至104~105个/ml,先在32±1℃中培养48~60 h,然后转入25±1℃培养。实验中比较供体植株的基因型,基本培养基的小孢子生长情况,花蕾的取样时间和位置,小孢子的培养密度,蔗糖浓度以及活性炭和6-BA的影响。结果表明NLN培养基培养小孢子成胚率(胚状体/花蕾数)最高,可达108.8%,并获得白色的愈伤组织。MS和B5培养基只有少数几个小孢子生成胚状体,而且都不能形成白色的愈伤组织;主枝花蕾的成胚率为108.8%优于侧枝花蕾的10.5%;较低的蔗糖浓度(130g/L)优于较高的蔗糖浓度(170g/L);高温诱导对小孢子的分裂启动有促进作用;加入活性炭的“液体-固体结合双层培养”方法在小孢子培养过程中没有起到明显的作用,但可以减少畸形胚的发生;6-BA对小孢子的成胚有明显的促进作用,但是其中畸形胚明显增多。

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