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在玻片上构建蛋白质芯片的实验研究

侯伟健  潘忠诚  何群  王绍成  马佳明  赵雨杰  
【摘要】:目的;探讨玻片蛋白质芯片的构建方法及其各种中间操作条件的选择与优化。方法:利用生物芯片点样仪将超微量蛋白质点到经特殊处理的玻璃片表面,然后选用不同的化学试剂对玻片背景进行封闭:再用荧光素(FITC)标记的蛋白质与点样蛋白杂交;最后用生物芯片分析仪扫描成像并进行分析,比较不同条件下芯片的显示效果。结果:蛋白质样品与片基稳定结合,并保持原活性状态:封闭试剂选用酪蛋白或明胶效果较佳;点样探针与其特异蛋白质抗体可稳定结合,结合效果与点样蛋白浓度在一定范围内呈正相关;在1.6×1.6cm的玻璃片面积上,构建了36×36=1269点的蛋白质芯片。结论:在本实验条件下,蛋白质抗原或抗体可以稳定地固定于经过处理的玻璃片表面,制成免疫型蛋白芯片,并可通过随后的抗原抗体反应与荧光标记的相应抗体或抗原结合,用生物芯片分析仪可对其荧光信号进行检测分析。

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