CRISPR/CAS9介导的布鲁氏菌基因敲除质粒的构建

【摘要】：正目的:构建病原基因缺失株是研究相关基因功能、研发新疫苗等的有效手段。试验以pBBR1MCS-5为骨架载体构建能够适用于布鲁氏菌的CRISPR/CAS9介导的基因敲除质粒,为获得布鲁氏菌基因缺失株提供技术和材料。方法:以能够在布鲁氏菌内复制的广宿主克隆载体pBBR1MCS-5为骨架载体,在其NsiⅠ和XbaⅠ酶切位点间插入庆大霉素抗性基因的启动子序列(GmR promoter),在布鲁氏菌内表达Cas9核酸内切酶;在XbaⅠ和SacⅠ酶切位点

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前2条

1	方锐;畅飞;孙照霖;李宁;孟庆勇;;CRISPR/Cas9介导的基因组定点编辑技术[J];生物化学与生物物理进展;2013年08期
2	梁振伟;饶书权;沈岩;许琪;;通过CRISPR/Cas9系统敲除人源PDE10A基因[J];基础医学与临床;2014年04期

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前6条

1	德艳艳;布鲁氏菌毒力相关基因及必需基因的全基因组水平筛选[D];中国农业大学;2017年
2	孙现军;CRISPR/Cas9基因定点突变体系构建与大豆抗旱相关gma-miR160功能研究[D];西北农林科技大学;2015年
3	刘玟杉;基于CRISPR/Cas9的拟南芥多基因编辑及其在基因功能研究中的应用[D];重庆大学;2015年
4	冯万有;基于CRISPR/Cas9系统靶向敲除水牛BMP15和GDF9基因的研究[D];广西大学;2015年
5	林芳宇;基于CRISPR/Cas9敲除小梁细胞Atg7后细胞外基质的改变及Melatonin对睫状体上皮CT流的影响[D];浙江大学;2016年
6	陈修贵;CRISPR/Cas9系统介导的棉花GhCLA1和GhVP基因编辑的研究[D];华中农业大学;2017年

中国硕士学位论文全文数据库

前10条

1	汪洋;布鲁氏菌中CRISPRi与CRISPR/Cas9系统的构建及功能验证[D];华中农业大学;2017年
2	李娜;布鲁氏菌中CRISPR-Cas9基因编辑技术研究[D];华中农业大学;2017年
3	赵泉丞;腺病毒介导的CRISPR/Cas9系统和BioID在研究体内蛋白相互作用中的应用[D];安徽医科大学;2015年
4	周林;两种用于CRISPR/Cas9靶效应和脱靶效应检测新方法的建立[D];苏州大学;2016年
5	宗渊;病毒介导CRISPR/Cas9烟草基因编辑系统的研究[D];青海师范大学;2016年
6	刘郁莹;基于CRISPR/Cas9系统的SND1基因敲除HeLa细胞稳定株的制备与鉴定[D];天津医科大学;2016年
7	段宇红;CRISPR/Cas9介导的PCV2功能蛋白基因的定点敲入的初步研究[D];湖南农业大学;2016年
8	潘文欢;小球藻CRISPR/Cas9基因编辑流程的建立和优化[D];华南理工大学;2016年
9	李世宇;CRISPR/Cas9技术在毕赤酵母和枯草芽孢杆菌中研究[D];湖北大学;2016年
10	胡君成;用CRISPR/Cas9系统构建原位表达dPit:GFP的果蝇品系[D];湖北大学;2016年

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