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利用细菌人工染色体技术构建表达鹦鹉热衣原体PmpD基因的重组HVT

刘杉杉  黄秀芬  姜良  孙盈  何诚  李永清  
【摘要】:家禽免疫的主要挑战来自于如何设计出只需接种单一剂量就可以防控多种疾病的疫苗。为了实现一针防两病(禽衣原体病和马立克氏病)的目的,本研究以火鸡疱疹病毒(HVT)为载体表达鹦鹉热衣原体多型外膜D蛋白(PmpD)抗原,构建同时抗禽衣原体病和马立克氏病的二价活载体疫苗。通过改造已经利用反向遗传技术构建的HVT感染性细菌人工染色体(BAC)克隆,使其表达PmpD基因,将重组的BAC转染鸡胚成纤维细胞(CEF)拯救病毒,获得HVT重组体(rHVT-PmpD)。通过Westernblotting分析感染rHVT-PmpD的CEF可知rHVT-PmpD表达了PmpD蛋白。

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