D型产气荚膜梭菌α毒素基因的克隆与高效表达
【摘要】：(目的)为建立产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)α毒素(cpa)克隆表达方法,(方法)应用PCR方法从羊源D型产气荚膜梭菌中扩增cpa成熟肽基因序列,将其插入pET-28b中,构建重组表达载体pET-28b-cpa;通过PCR扩增、双酶切和测序方法对重组载体进行鉴定及序列分析,然后转入BL21(DE3)pLysS中并诱导表达;用SDS-PAGE检测目的蛋白大小及分布,Western Blotting方法检测其反应原性。(结果)结果表明,所扩增的cpa基因大小为1110 bp,与GeneBank参比序列同源性为99%以上;SDS-PAGE分析表明,目的蛋白大小为41.2 KDa,与预期大小一致,在超声波裂解上清和包涵体中均有分布,但主要以包涵体为主,两者分布均具有和天然毒素相似的反应原性。(结论)该研究为进一步开展cpa的批量纯化及疫苗制备奠定基础。
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赵志虎,马清钧;合成人干细胞cDNA在大肠杆菌中的高效表达与纯化[J];生物技术通讯;2004年02期 |
| 2 |
蔡月琴;马益萍;申会刚;郭军庆;周继勇;;狂犬病病毒核蛋白基因在大肠杆菌中的高效表达[J];中国兽医科学;2007年02期 |
| 3 |
殷尔康;;木聚糖酶基因xynA在大肠杆菌中的高效表达[J];现代农业科技;2011年12期 |
| 4 |
哈卓;赵丽丽;于晓旭;宗晓淋;毛雅元;张健;李一经;葛俊伟;乔薪瑗;唐丽杰;;重组猪乳铁蛋白N端的高效表达及抑菌活性检测[J];生物工程学报;2010年04期 |
| 5 |
张毅,叶棋浓,滕家波,刘及,苏国富;人单核细胞趋化蛋白-1在大肠杆菌中的高效表达及其生物学活性[J];基础医学与临床;1999年04期 |
| 6 |
杨登峰;韦宇拓;黄志明;周兴;黄日波;;pfl-act基因在大肠杆菌中的高效表达及其纯化[J];广西农业生物科学;2006年04期 |
| 7 |
涂宣林,宋后燕;P.pastoris高效表达外源蛋白的研究进展[J];生物工程进展;1998年04期 |
| 8 |
王希菊,蒋宇,邵蔚蓝;海栖热袍菌胞外α-淀粉酶在E·coli中的高效表达[J];微生物学通报;2005年04期 |
| 9 |
朱明月;沈文涛;周鹏;;改造的sTRAIL基因在重组毕赤氏酵母菌中的表达及活性分析[J];药物生物技术;2007年01期 |
| 10 |
杨志平;王筱兰;孙兵兵;;GL-7ACA酰化酶基因工程菌(E.coliBL21(DE3)pYW-GA)发酵工艺的优化[J];南昌大学学报(工科版);2007年03期 |
| 11 |
周海燕;饶力群;吴永尧;;甘露聚糖酶man23基因的重组及其在短短芽孢杆菌中的表达[J];浙江大学学报(农业与生命科学版);2008年04期 |
| 12 |
戚薇;铁瑛;;SAM合成酶基因的克隆及在酿酒酵母中的高效表达[J];天津科技大学学报;2008年04期 |
| 13 |
刘德辉;何俊;林云熊;黄毓茂;;抗菌肽LL-37在毕赤酵母SMD1168中的高效表达及活性鉴定[J];中国预防兽医学报;2010年02期 |
| 14 |
赵志军,许崇波,曾瑾,王玉炯;A型产气荚膜梭菌α毒素基因的高效表达[J];生物技术;2004年05期 |
| 15 |
程度胜;俞炜源;韩素文;李秀珍;李风知;胡宝成;方继明;黄翠芬;;人尿激酶原cDNA在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中高效表达研究[J];生物工程学报;1993年03期 |
| 16 |
邬小兵,乐国伟,张必武,施用晖;影响毕赤酵母高效表达外源蛋白的因素[J];生物技术;2002年04期 |
| 17 |
任杰;郭丽清;贾娴;蒋雅红;游松;;移动单孢菌丙酮酸脱羧酶基因的克隆及表达[J];沈阳药科大学学报;2006年11期 |
| 18 |
李世崇;叶玲玲;杨海;刘红;许建;吴本传;黄培堂;陈昭烈;;人工转录因子促进外源基因在CHO细胞中的高效表达[J];生物工程学报;2007年01期 |
| 19 |
李爽;李恒鑫;刘辉;袁新宇;杨明明;龚月生;;谷氨酰t-RNA还原酶基因(hemA)的高效表达[J];中国生物工程杂志;2007年06期 |
| 20 |
刘堰;苏畅;宋小双;汤雅岚;包振鸿;;表达食血蝙蝠唾液纤溶酶原激活剂的毕赤酵母菌株的构建[J];生物工程学报;2009年04期 |
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