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兔GnIH及其受体基因的克隆及体内表达

刘晶  雷治海  苏娟  刘延鹏  李珣  赵洋阳  施玉萍  
【摘要】:促性腺激素抑制激素(gonadotropin-inhibitory hormone,GnIH)是近年发现的一种RF酰胺肽,具有抑制促性腺激素合成和分泌的作用。文献中未见对兔GnIH及其受体基因克隆和分布定位的报道,本文用RT-PCR方法克隆了兔GnIH及其受体基因,并研究了他们在兔体内的表达。结果如下:1、克隆了兔GnIH及其受体NPFFR-1和NPFFR-2的部分核苷酸序列,并将其登录在GenBank数据库中,登录号分别为HM744733、JF826513和JF907578。兔GnIH的氨基酸序列为:RFRP-1序列:MPHAAATLPL RF;RFRP-2序列:SPQPVANLPLRF;RFRP-3序列:IPNLPQRF。2、兔GnIH基因核苷酸序列与绵羊、牛、猕猴、人类等哺乳动物的核苷酸同源性分别为88%、83%、83%、82%,与野猪、黑线毛足鼠、小鼠同源性较低,分别为79%、77%、75%。兔NPFFR-1和NPFFR-2的核苷酸和氨基酸序列与其它物种均具有较高的同源性,跨膜分析显示这两个受体氨基酸具有典型的跨膜结构。3、GnIH及其受体mRNA在兔体内表达广泛。GnIH在眼表达最高,下丘脑次之,在肝、肾、肾上腺、垂体、杏仁核、脊髓、嗅球、脑桥、小脑、延髓、海马、卵巢、睾丸、附睾、心、脾、胰也有表达。NPFFR-1在下丘脑、中脑、小脑、梨状叶、杏仁核、延髓、嗅球、脊髓、海马、垂体、脑桥、卵巢、睾丸、附睾、子宫、膀胱、眼、食管、乳腺、胰腺、胸腺、十二指肠等广泛分布。NPFFR-2在下丘脑、中脑、卵巢、睾丸、眼、肾上腺、梨状叶、杏仁核、延髓、嗅球、脊髓、海马、垂体、脑桥等有不同程度的表达。这些结果与在其它动物上获得的结果基本相似,表明GnIH及其受体在进化上是保守的。

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