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镉对体外培养大鼠大脑皮质神经元钙稳态的影响

袁燕  孙娅  江辰阳  刘学忠  顾建红  卞建春  刘宗平  
【摘要】:【目的】研究镉对体外培养大鼠大脑皮质神经元钙稳态的影响。【方法】选用原代培养大鼠大脑皮质神经元为模型,用神经元特异性烯醇化酶(NSE)抗体经免疫组织化学染色技术鉴定神经元。用不同浓度(0、5、10、20μmol/L)醋酸镉染毒大鼠大脑皮质神经元12h,利用流式细胞仪检测细胞内[Ca~(2+)]ATPase酶试剂盒测定Na~+-K~+-ATPase和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase活性的变化,荧光定量PCR法测定钙调蛋白(CaM)mRNA转录水平。【结果】免疫组化染色证实培养细胞呈现NSE阳性染色,证明是神经元。与对照组相比,各镉染毒组细胞内[ca~(2+)],显著或极显著升高(P0.05或P0.01),Na~+-K~+-ATPase和ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase活性显著或极显著降低(P0.05或P0.01),20μmol/L组CaM mRNA转录水平极显著降低(P0.01)。【结论】镉通过影响CaM的转录水平与维持钙稳态相关的酶(Na~+-K~+-ATPase和ca~(2+)Mg~(2+)-ATPase)活性,干扰神经元细胞内钙稳态,进而造成神经元细胞损伤。

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