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兔隐孢子虫生物学特性研究

吴国泉  齐萌  王荣军  菅复春  宁长申  张龙现  
【摘要】:为研究兔隐孢子虫的生物学特性,用兔隐孢子虫分别感染日本大耳白仔兔、免疫抑制蒙古沙鼠、BABL/c小鼠、雏鸡,研究其宿主范围及致病性。结果显示,6个不同剂量(10个·只~(-1).0×10~6个·只~(-1))隐孢子虫卵囊接种仔兔后,其排卵囊规律和致病性存在差异,10个·只~(-1)卵囊即可感染,潜隐期为3-5d,显露期为8-11d,10个·只~(-1)和100个·只~(-1)卵囊接种仔兔后无明显临床症状,1000个·只~(-1)和1.0×10~4个·只~(-1)卵囊可引起仔兔粪便不成形、粪便量增多等临床症状,1.0×10~5个·只~(-1)和1.0×10~6个·只~(-1)卵囊可引起明显增重缓慢;1.0×10~(-1)个·只~(-1)卵囊接种90目龄日本大耳白兔,潜隐期为5d,显露期为6d,感染后第7d为排卵囊高峰;2.0×10~5个·只~(-1)卵囊接种免疫抑制蒙古沙鼠后,潜隐期为2d,显露期为5-9d,感染后第3-5d达到排卵囊高峰期,而免疫正常蒙古沙鼠则不感染;2.0×10~5个·只~(-1)卵囊接种免疫抑制BABL/c小鼠、免疫正常BABL/c小鼠和雏鸡,均不感染。病理组织学观察发现,虫体主要寄生于蒙古沙鼠和兔的空肠及回肠绒毛刷状缘,回肠寄生虫体较多,虫体寄生部位肠黏膜表面出现凹陷,肠绒毛脱落或变短。基于18S rRNA基因位点对动物试验前后所获卵囊进行PCR扩增,对其产物分别用SspⅠ酶和VspⅠ酶进行RFLP分析;基于GP60基因PCR产物测序并进行分子生物学分析,结果显示卵囊均为人兽共患的兔隐孢子虫(Cryptosporidium cuniculus),均属Vb亚型家族。本研究为进一步研究兔隐孢子虫分子遗传特征,人兽共患传播机制及防治方法奠定了基础。

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