柔嫩艾美耳球虫抗药性相关基因M_(20)的克隆与表达

【摘要】：利用前期构建的柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)地克珠利抗药株和马杜拉霉素抗药株与各自母株之间的抑制性消减文库而获得的ESTs序列,选择其中一个差异表达的EST序列(克隆号:M20),采用RACE技术,以柔嫩艾美耳球虫敏感株孢子化卵囊cDNA为模板,扩增获得了该基因的全长cDNA序列,命名为M20。该基因全长847 bp,包括一个525 bp的开放阅读框,编码174个氨基酸,预测理论分子量约为19 ku。实时荧光定量PCR结果显示,该基因在敏感株中表达量高于地克珠利抗药株和马杜拉霉素抗药株;在不同发育阶段中,未孢子化卵囊表达量高于孢子化卵囊、子孢子以及裂殖子阶段虫体。将该基因克隆于原核表达质粒pET28b中,构建重组质粒pET28b-M20,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,经IPTG诱导表达获得了重组蛋白,分子量约为23 ku,该蛋白以包涵体形式存在,在IPTG诱导8 h后表达稳定,Western blot检测表明,其具有较好的免疫原性。

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2	韩红玉;姜连连;赵其平;董辉;陈兆国;林矫矫;黄兵;;银染mRNA差异显示法克隆柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)抗药性相关基因[J];中国兽医学报;2006年04期
3	艾哈迈德,李国清,蔡建平,覃宗华,谢明权,吴惠贤,彭新宇,魏文康;柔嫩艾美耳球虫广东株微线蛋白-2基因的克隆与序列分析[J];广东农业科学;2003年01期
4	韩红玉,赵其平,姜连连,董辉,陈兆国,黄兵;柔嫩艾美耳球虫抗马杜拉霉素、地克珠利虫株特异消减文库的构建[J];中国农业科学;2005年08期
5	简永利;蔡建平;于三科;覃宗华;林青;叶秀华;陈闻;党海斌;;柔嫩艾美耳球虫表面抗原SAG2基因的克隆与表达[J];畜牧与兽医;2006年06期
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7	王秋悦;任科研;宫鹏涛;李建华;张西臣;;柔嫩艾美耳球虫rhomboid抗原基因在卡介苗中的克隆与表达[J];中国预防兽医学报;2009年04期
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12	金光明,张岱芊,顾有方,吴齐鸿,陈会良,康健;柔嫩艾美耳球虫感染后组织抗氧化功能的动态变化[J];中国兽医学报;2002年03期
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14	王黎霞,安健,张永红,杨静,夏茂华,曲京红;柔嫩艾美耳球虫交叉抗药性试验[J];动物医学进展;2005年04期
15	王慧珍;徐福亮;周玉武;邹明;;癸氧喹酯抗柔嫩艾美耳球虫山东临沂分离株的效果观察[J];畜牧与兽医;2010年03期
16	程军;董辉;郭涛;韩红玉;姜连连;赵其平;朱顺海;马卫娇;曾艳波;孔春林;李婷;黄兵;;柔嫩艾美耳球虫抗药性相关基因M_(20)的克隆与表达[J];中国动物传染病学报;2011年01期
17	张健騑,谢明权,彭新宇,吴惠贤,魏文康;球虫细胞培养影响因素探讨[J];广东农业科学;1999年05期
18	安健,汪明,孔繁瑶,殷佩云;马杜霉素对柔嫩艾美耳球虫线粒体的影响[J];中国农业大学学报;2002年03期
19	安健,汪明,孔繁瑶,殷佩云;马杜霉素对柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)超微结构的影响[J];中国兽医学报;2002年01期
20	蒋建林,蒋金书;柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子中的Etmic-2基因克隆及测序[J];中国兽医杂志;2002年03期

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1	程军;董辉;郭涛;韩红玉;姜连连;赵其平;朱顺海;马卫娇;曾艳波;孔春林;李婷;黄兵;;柔嫩艾美耳球虫抗药性相关基因M_(20)的克隆与表达[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会论文集[C];2011年
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4	韩红玉;姜连连;赵其平;董辉;陈兆国;黄兵;;银染mRNA差异显示法克隆柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)抗药性相关基因[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第五次代表大会暨第八次学术研讨会论文集[C];2004年
5	宋鸿雁;严若峰;徐立新;宋小凯;李祥瑞;;堆型艾美耳球虫乳酸脱氢酶基因的克隆与表达[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会论文集[C];2011年
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2	王海燕;IBR间接ELISA的建立及重组gE糖蛋白与单抗的研制[D];吉林大学;2006年
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4	欧瑜;猪链球菌2型毒力相关蛋白的检测及其基因片段的克隆与表达[D];南京农业大学;2001年
5	景志忠;猪带绦虫六钩蚴cDNA表达文库的构建及免疫原基因的筛选、克隆与表达[D];中国农业科学院;2003年
6	孔娜;mChIL-18基因与IBDV VP2基因或AIV HA1基因在pFastBac~(TM) Dual中的共表达及其免疫原性研究[D];山东农业大学;2011年
7	郑君;柔嫩艾美耳球虫Rhomboid蛋白与微线蛋白相互作用的研究[D];吉林大学;2011年
8	李佩国;河北省鸡柔嫩艾美耳球虫地方株的耐药性检测[D];吉林大学;2010年
9	姜连连;柔嫩艾美耳球虫DF-1细胞培养体系的建立及EtSerpin，EtAMA1基因功能的初步研究[D];中国农业科学院;2011年
10	安健;柔嫩艾美耳球虫抗药性虫体纯化及mRNA差异显示的研究[D];中国农业大学;2004年

中国硕士学位论文全文数据库

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1	丛彦龙;猪A组轮状病毒VP6基因的克隆与表达[D];吉林农业大学;2004年
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3	王异民;猪瘟病毒E2蛋白主要免疫显性抗原多肽原核表达及初步应用[D];吉林大学;2009年
4	褚明亮;奶牛乳房炎链球菌的分离鉴定及抗原基因的克隆和表达[D];石河子大学;2008年
5	陈勇;猪β_2肾上腺素能受体基因的扩增、克隆与表达[D];南京农业大学;2000年
6	刘海艳;一株新的纤维分解菌的分离及纤维素酶的克隆与表达[D];西北农林科技大学;2012年
7	陶玉成;犬传染性肝炎病毒Hexon蛋白基因的克隆与表达[D];新疆农业大学;2010年
8	韩乾忠;柔嫩艾美耳球虫病毒的鉴定及细胞内分布[D];吉林大学;2011年
9	扈炳新;柔嫩艾美耳球虫3-1E基因的原核表达和真核表达质粒的构建及免疫保护性研究[D];东北农业大学;2010年
10	马卫娇;柔嫩艾美耳球虫3个发育相关基因的研究[D];上海师范大学;2011年

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1	唐式校陈雪梅时芝红李前福李成珍;用药要有针对性[N];江苏农业科技报;2006年
2	刘越西　徐仁元记者金姝;世界首例赖氨酸转基因克隆奶牛在吉大农学部培育成功[N];吉林日报;2011年
3	山西恒丰强动物药业有限公司技术支持部王华听;鸡球虫病的发病特点与防治[N];中国畜牧兽医报;2006年
4	黄勇娣;世界首例转基因克隆兔在沪诞生[N];解放日报;2007年
5	;常用抗球虫药的特点及使用方法[N];江苏农业科技报;2006年
6	王婷婷;我国完成世界首例转基因克隆兔实验[N];科技日报;2007年
7	沈阳农业大学畜牧兽医学院宁志利;防治鸡球虫病：准确诊断选用药[N];江苏农业科技报;2006年
8	王有佳;全球首例转基因克隆兔在沪诞生[N];人民日报;2007年
9	记者王中宙;25只转基因克隆绵羊在内蒙古农业大学诞生[N];呼和浩特日报(汉);2010年
10	山西恒丰强动物药业有限公司广州公司高怀涛;南方冬季勿忽略鸡球虫病[N];中国畜牧兽医报;2006年

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