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Analysis of T cell receptor(TCR)usage in Eimeria maxima immunized SPF white leghorn chickens

【摘要】:正Among seven Eimeria species that infect chickens,Eimeria maxima is the most immunogenic species and can elicit full immune protection in vaccinated hosts.Recent findings suggest that immunodominant protective antigens exist in several protozoan parasites,such as GRA6 antigen derived from Toxoplasma gondii,a protozoa belonging to Eimeriidae.So it is logically to assume that one or a few immunodominant antigens also exist in E.maxima,which can induce the expansion of E.maxima-specific CD8+T cell population(s) in the hosts.In other words,one or more CD8+T cell populations expressing same T cell receptors(TCRs) could be detected in a much higher frequency in the whole CD8+T cell population. Here we endeavored to reveal whether biased TCR usage exists in TCRβrepertoire in E.maxima infected chickens.SPF white leghorn chickens were immunized orally with 3 doses of E.maxima oocysts or just PBS as control.Isolated CD8+T cells from blood and small intestine were subjected subsequently to total RNA extraction,cDNA synthesis and PCR amplification of TCR Vβchain sequences containing complementarity-determining region 3(CDR3).We obtained 110 sequences from 3 unimmunized chickens, 90 sequences from one chicken 2 days post the third immunization and 150 sequences from 3 chickens 5 days post challenge.The analysis of CDR3 regions revealed that there was no biased TCR usage in CD8+T cells derived from the peripheral blood mononuclear cells(PBMCs) of the unimmunized or immunized birds.However,the TCRβrepertoire showed biased TCR usage in the intra-epithelial CD8+lymphocytes (IELs) from the challenged birds,and these biased TCRs were also existed in other challenged birds.More data are needed to confirm the persistence and public usage of the predominant TCRβclonotype distribution in more challenged birds.

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