牛源HBV套式PCR方法建立及其S靶基因同源性分析

【摘要】：为建立牛源HBV病毒套式PCR检测方法,并对牛源HBV S基因进行序列分析。根据GenBank中人HBV S基因,设计2对引物,通过对PCR反应条件进行优化,建立检测牛源HBV的套式PCR诊断方法,并进行S基因片段序列同源性和系统发育进化树分析。结果表明,该方法第1次PCR扩增的敏感性是1.00 pg,第2次PCR敏感性是0.32 fg,扩增产物分别为509 bp、240 bp,而牛病毒性腹泻病毒、丝状支原体丝状亚种SC型、牛结核分枝杆菌的扩增结果均为阴性。牛源HBV S基因片段序列与GenBank中人HBV S基因进行比对,核苷酸同源性98.8%～99.4%,氨基酸序列同源性97.1%～98.3%。研究表明建立的牛源HBV套式PCR具有很好的特异性和敏感性,可用于牛源HBV的检测,便于进一步研究牛源HBV与人HBV之间的关系。