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J亚群禽白血病病毒gp85基因在杆状病毒中的表达及鉴定

倪伟  秦立廷  高玉龙  潘伟  祁小乐  高宏雷  王永强  王笑梅  
【摘要】:为获得J亚群禽白血病病毒的gp85蛋白,将ALV-J的gp85基因克隆至载体pFastBac-HTA中,构建重组转座载体pFgp85,并将其转化DH10_(Bac)~(TM)大肠杆菌感受态细胞,使gp85基因整合到Bacmid穿梭载体中,获得重组穿梭载体Bacgp85。通过脂质体介导将重组穿梭载体转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒rBac-gp85。通过western blot和IFA,分析结果表明ALV-J gp85蛋白在Sf9昆虫细胞中获得正确表达,所表达的重组gp85蛋白分子量约为38 ku。ALV-J gp85重组蛋白在Sf9细胞中的表达为其功能研究和应用研究提供了良好的基础。

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