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鸡白痢沙门氏菌外膜蛋白C(ompC)的原核表达

贺聪  林崇韫  陈峰  毕英佐  谢青梅  
【摘要】:本实验根据GenBank中的ompC基因序列,设计合成引物OMPC1/OMPC2,应用PCR方法从鸡白痢沙门氏菌基因组DNA中扩增出ompC基因,将所扩增ompC基因片段插入载体pMD19-T,测序得到ompC基因的序列。根据该ompC基因的测序结果,设计合成一对带酶切位点的引物PcNdeI/PcXhoI,从pMD19-T-ompC上扩增出带酶切位点的ompC基因,通过酶切、连接、转化,构建了原核表达质粒Pet28a(+)-ompC,将该质粒转化大肠杆菌BL21。SDS-PAGE检测获得与预期大小一致的目的蛋白ompC。Western blot试验表明表达的ompC蛋白具有免疫反应性。本研究为进一步研究鸡白痢沙门氏菌外膜蛋白C(ompC)基因工程疫苗及鸡沙门氏菌病的防制奠定了基础。

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