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丙戊酸处理促进了猪孤雌激活胚胎早期体外发育

赵明辉  金永勋  康锦丹  梁爽  高威威  刘希  尹熙俊  
【摘要】:丙戊酸(VPA)是一种组蛋白去乙酰基酶抑制剂,可以有效地抑制组蛋白去乙酰基酶的活性,进而维持染色体组蛋白乙酰基化状态,从而达到调节染色体基因表达的目的。本实验主要研究不同时间的VPA处理对猪体细胞核移植和孤雌激活胚胎早期体外发育的影响。实验一,使用化学辅助去核方法对体外成熟38小时的猪卵母细胞进行去核,将转染绿色荧光蛋白基因的猪耳部成纤维细胞注入到卵黄间隙中后使用电脉冲进行融合和激活。实验二,将体外成熟41h的猪卵母细胞利用与实验一中相同的激活方法进行激活。实验一与实验二中的胚胎激活后均使用2mM VPA对进行处理48h和72h,对照组不进行处理。结果显示:对核移植胚胎使用2mM的VPA处理,48h、72h和对照组之间囊胚率没有显著性差异(分别为5.10%,3.12%vs.4.00%,p0.05)。使用2mM的VPA对孤雌激活胚胎处理,48h、72h组和对照组之间卵裂率没有显著性差异(分别为73.50%,59.52%vs.65.86%,p0.05),但48h组囊胚率显著性的高于72h组和对照组(分别为17.88%,8.73%vs.7.78%,p0.05)。结果表明:本实验条件下,2mM VPA处理48h可以提高猪孤雌激活卵母细胞体外早期发育能力,但未观察到对体细胞核移植胚胎的早期发育有促进作用。

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